04-06-2012, 10:35 AM
Định lượng Glucose trong huyết thanh
(Phương pháp dùng enzym gluco oxydase và Peroxydase)
Glucose của cơ thể có nguồn gốc nội sinh và ngoại sinh. Ngoại sinh là đưa từ bên ngoài vào qua thức ăn (thức ăn chứa nhiều glucose là ngũ cốc, hoa quả...). Nội sinh là quá trình cơ thể tự tổng hợp glucose từ các quá trình chuyển hoá lipid, protid và các quá trình chuyển hoá khác. Glucose không chỉ tham gia cấu tạo nên cơ thể mà còn là nguồn cung cấp năng lượng quan trọng cho cơ thể. Đây là dạng duy nhất cung cấp năng lượng cho não vì chỉ có glucose mới qua được hàng rào máu não. Điều này giúp ta hiểu được các rối loạn và tổn thương thần kinh khi hạ đường máu. Khi nồng độ glucose tăng cao trong máu sẽ bị đào thải ra bên ngoài qua nước tiểu. Ngưỡng của thận với glucose là 1,7 g/ l( 9,35mmol/l). Việc duy trì cân bằng đường máu là cần thiết. Gan là cơ quan có chức năng rất quan trọng trong việc duy trì cân bằng này.
2. Nguyên tắc kỹ thuật:
Glucose trong huyết thanh được xác định theo phản ứng sau:
GOD
Glucose + H[sub]2[/sub]O ----------------------------------> Acid gluconic + H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]
( GOD : Gluco oxy dase )
POD
2H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]+ Phenol + 4 amino-Antipyrin ---------------------------> Quinonemin + 4H[sub]2[/sub]O
(Peroxydase)
Đậm độ mầu của phức hợp tạo thành tỷ lệ thuận với nồng độ glucose trong huyết thanh và được xác định ở bước sóng 505 nm..
3. Chuấn bị:
Dụng cụ: ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm, pipep, bút ghi kính, bộ đò lấy máu tĩnh mạch, máy ly tâm, máy đo quang
Bệnh phẩm: huyết thanh hoặc huyết tương.
Hoá chất: dung dịch xét nghiệm glucose, glucose mẫu nồng độ 5,55 mmol/l
4.Tiến hành:
- Lấy máu đúng kỹ thuật, ly tâm lấy huyết thanh
- Hút 500µLl reagent A - glucose vào 3 ống: ống trắng (blank), ống mẫu (standard), ống thử (sample).
- Hút 5µL standard - glucose vào ống mẫu
- Hút 5µL sample (huyết thanh hoặc dịch não tuỷ) vào ống thử.
- Lắc đều để 10 phút ở nhiệt độ phòng hoặc 5 phút/ 37[sup]0[/sup], đo máy bước sóng 505 nm.
- Tác phong: sạch, gọn, đúng kỹ thuật, đúng thời gian (40 - 50phút)
5. Nhận định kết quả:
Giá trị bình thường 3,9 – 6,4 mmol/l.
Trong trường hợp xét nghiệm lúc đói 3 lần liên tiếp nông độ glucose máu > 7,1 mmol/l hoặc xét nghiệm lúc bất kỳ nồng độ glucose máu > 11,1 mmol/l người bệnh được xác định là đái tháo đường.
Khi glucose máu < 2,5 mmol/l, người bệnh được xác định là hạ đường huyết.
Trong trường hợp nồng độ glucose huyết thanh cao trên mức 20 mmol/l, người bệnh có nguy cơ hôn mê do tăng áp lực thẩm thấu.
Lưu ý: Lượng hút phụ thuộc vào hóa chất bạn đang dùng (ở đây chỉ mang tính tham khảo)
khóc trong bóng tối
giờ mà còn không biết cách pha loãng ah? Tùy vào nồng độ mà bạn pha loãng 2 lần, 4 lần, hay 10 lần... Ví dụ bạn hút 1ml huyết thanh+ 1ml nước cất là pha loãng 2 lần, 1ml huyết thanh + 3ml nước cất là pha loãng 4 lần, tương tự 1ml huyết thanh + 9ml nước cất là 10 lần...