04-03-2013, 10:18 PM
NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE
ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS
ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS
1. Nguyên lý
Khi thrombin tác động lên fibrinogen tạo fibrin, một ít fibrin không được polyme hoá sẽ hình thành phức hệ hoà tan với fibrinogen và FDP. Những phức hệ này có thể được phát hiện in vitro bởi ethanol hoặc protamin sulphate.
Xét nghiệm dùng để đánh giá sự tăng hoạt hóa của hệ thống đông máu
2. Chuẩn bị:
2.1. Dụng cụ:
- Ống nghiệm, pipet, nồi cách thủy, máy ly tâm
2.2. Hóa chất:
- Huyết tương citrat
- Protamin sulphate 1% hoặc ethanol 50% trong nước cất.
- Chứng dương: thêm 0,1 ml thrombin ( 0,2 đơn vị NIH /ml ) vào 0,9 ml huyết tương citrat và ủ vào bình cách thuỷ 370C trong 30 phút. Những sợi fibrin sẽ được hình thành trong thời gian ủ và sẽ được nhận thấy khi quay ly tâm.
2.3. Bệnh nhân
- Nhịn ăn, không đang sử dụng các thuốc chống đông
3. Tiến hành kỹ thuật
3.1. Nghiệm pháp protamin sulphate:
- Thêm 0,05 ml protamin sulphate vào ống nghiệm chứa 1 ml huyết tương bệnh và ống chứng dương.
- Đặt ống trong bình nồi thuỷ 3 phút.
Kết quả dương tính dương tính khi thấy hình thành lưới hoặc sợi fibrin. Nếu không thấy là kết quả âm tính.
3.2. Nghiệm pháp Ethanol:
- Trong ống nghiệm có 0,45 ml huyết tương citrat giàu tiểu cầu cho thêm 0,15 ml ethanol 50%, đậy nút kín, đặt ở nhiệt độ 40C trong 10 phút.
- Lấy ống nghiệm ra xem. Nếu có sự hình thành gel hoặc đông là kết quả dương tính. Nếu không có gel là âm tính.
4. Kết quả:
Nghiệm pháp dương tính khi có sự tăng hoạt hóa hệ thống đông máu. Gặp trong DIC (đông máu rải rác trong lòng mạch).
- Khi kết quả dương tính có nghĩa là bệnh nhân bị DIC, nhưng khi kết quả âm tính thì cũng không loại trừ tình trạng DIC.
5. Các yếu tố ảnh hưởng kết quả
- Dụng cụ lấy máu không đúng quy cách (ống đựng bệnh phẩm phải là nhựa hoặc thuỷ tinh có tráng silicon)
- Mẫu máu xét nghiệm bị đông
- Dụng cụ làm xét nghiệm không sạch
. kỹ thuật thời gian máu chảy có cồn 90 , em pha từ cồn 90--50 dùng tạm thì có ảnh hưởng nhiều lắm không thầy???? ( tận dụng cái sẵn có 