+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Huyết học - Truyền máu (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-70.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-102.html)
+---- Chủ đề: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS (/thread-2150.html)
NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - tuyenlab - 04-03-2013
NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE
ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS
ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS
1. Nguyên lý
Khi thrombin tác động lên fibrinogen tạo fibrin, một ít fibrin không được polyme hoá sẽ hình thành phức hệ hoà tan với fibrinogen và FDP. Những phức hệ này có thể được phát hiện in vitro bởi ethanol hoặc protamin sulphate.
Xét nghiệm dùng để đánh giá sự tăng hoạt hóa của hệ thống đông máu
2. Chuẩn bị:
2.1. Dụng cụ:
- Ống nghiệm, pipet, nồi cách thủy, máy ly tâm
2.2. Hóa chất:
- Huyết tương citrat
- Protamin sulphate 1% hoặc ethanol 50% trong nước cất.
- Chứng dương: thêm 0,1 ml thrombin ( 0,2 đơn vị NIH /ml ) vào 0,9 ml huyết tương citrat và ủ vào bình cách thuỷ 370C trong 30 phút. Những sợi fibrin sẽ được hình thành trong thời gian ủ và sẽ được nhận thấy khi quay ly tâm.
2.3. Bệnh nhân
- Nhịn ăn, không đang sử dụng các thuốc chống đông
3. Tiến hành kỹ thuật
3.1. Nghiệm pháp protamin sulphate:
- Thêm 0,05 ml protamin sulphate vào ống nghiệm chứa 1 ml huyết tương bệnh và ống chứng dương.
- Đặt ống trong bình nồi thuỷ 3 phút.
Kết quả dương tính dương tính khi thấy hình thành lưới hoặc sợi fibrin. Nếu không thấy là kết quả âm tính.
3.2. Nghiệm pháp Ethanol:
- Trong ống nghiệm có 0,45 ml huyết tương citrat giàu tiểu cầu cho thêm 0,15 ml ethanol 50%, đậy nút kín, đặt ở nhiệt độ 40C trong 10 phút.
- Lấy ống nghiệm ra xem. Nếu có sự hình thành gel hoặc đông là kết quả dương tính. Nếu không có gel là âm tính.
4. Kết quả:
Nghiệm pháp dương tính khi có sự tăng hoạt hóa hệ thống đông máu. Gặp trong DIC (đông máu rải rác trong lòng mạch).
- Khi kết quả dương tính có nghĩa là bệnh nhân bị DIC, nhưng khi kết quả âm tính thì cũng không loại trừ tình trạng DIC.
5. Các yếu tố ảnh hưởng kết quả
- Dụng cụ lấy máu không đúng quy cách (ống đựng bệnh phẩm phải là nhựa hoặc thuỷ tinh có tráng silicon)
- Mẫu máu xét nghiệm bị đông
- Dụng cụ làm xét nghiệm không sạch
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - svxn_hmtu - 04-28-2013
Cho em hỏi cụm từ " in vitro " nghĩa là gì ạ . Sao không Việt hóa từ này thầy ????
Em học huyết 2 thấy , kỹ thuật phát hiện / định lượng D-Dimer , đọc sách cũng ít nói , thầy nói cho em vài thông tin về "D-Dimer " .( nguyên lý , ý nghĩa , quy trình , giá trình bình thường )
Em cảm ơn
À , huyết 3 có nói nhưng sơ sài , hì . Cầm đèn tí ạ
2. Em hỏi thêm : Mình pha cồn từ 70---- cồn 50 để làm được không thầy . Mà nếu sai tỷ lệ cồn thì xét nghiệm sẽ ảnh hưởng như thế nào ?
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - tuyenlab - 04-29-2013
(04-28-2013, 10:33 PM)svxn_hmtu Đã viết: Cho em hỏi cụm từ " in vitro " nghĩa là gì ạ . Sao không Việt hóa từ này thầy ????
Em học huyết 2 thấy , kỹ thuật phát hiện / định lượng D-Dimer , đọc sách cũng ít nói , thầy nói cho em vài thông tin về "D-Dimer " .( nguyên lý , ý nghĩa , quy trình , giá trình bình thường )
Em cảm ơn
À , huyết 3 có nói nhưng sơ sài , hì . Cầm đèn tí ạ
2. Em hỏi thêm : Mình pha cồn từ 70---- cồn 50 để làm được không thầy . Mà nếu sai tỷ lệ cồn thì xét nghiệm sẽ ảnh hưởng như thế nào ?
1. In vitro có nghĩa là trong ống nghiệm.
- về định định lượng D-Dmer mình không nhớ quy trình chính xác vì chưa làm. Chỉ biết dựa trên phương pháp ngưng kết hạt latex. Nếu cần quy trình thì vài hôm nữa mình sẽ viết bài đầy đủ về cái này.
2. Không nên pha từ cồn 70 thành cồn 50 vì sẽ không chính xác. Do pha nhiều lần gây ra sai số. Nên sử dụng cồn tuyệt đối để pha. Nếu pha thấp hơn 50 thì không đủ để tạo gel. Lớn hơn 50 sẽ kết tủa fibrinogen. Do đo người ta thấy ở 50 là tốt nhất.
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - svxn_hmtu - 04-29-2013
Thầy cho em lời khuyên cái : " Em thấy XN này hóa chất đơn giản , cũng dễ làm . Em muốn tự mình làm , nhưng XN này liên quan đến Huyết 3 , bây giờ mà làm công khai thì thể nào cũng ăn gạch của bọn bạn ( em sợ bạn bảo cầm đèn ,) . XN này em thấy khó nhất cái tìm cồn 100 . Hicc
. kỹ thuật thời gian máu chảy có cồn 90 , em pha từ cồn 90--50 dùng tạm thì có ảnh hưởng nhiều lắm không thầy???? ( tận dụng cái sẵn có )
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - tuyenlab - 04-29-2013
(04-29-2013, 11:19 AM)svxn_hmtu Đã viết: Thầy cho em lời khuyên cái : " Em thấy XN này hóa chất đơn giản , cũng dễ làm . Em muốn tự mình làm , nhưng XN này liên quan đến Huyết 3 , bây giờ mà làm công khai thì thể nào cũng ăn gạch của bọn bạn ( em sợ bạn bảo cầm đèn ,) . XN này em thấy khó nhất cái tìm cồn 100 . Hicc
Cồn 100 thì không có. Mình chỉ có cồn 99,7 thôi. Vấn đề dễ làm nhưng không có mẫu máu dương tính. Nếu em tìm được mẫu dương tính mình sẽ cho hóa chất mà làm. (xin mẫu của bệnh nhân đa chấn thương, rắn cắn...)
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - nguyenhang.xn4a - 09-17-2013
thầy cho em hỏi là sao dùng cồn lớn hơn 50 sẽ kết tủa firinogen? có liên quan đến lượng protein trong huyết thanh không?
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - mexanh_vthq - 12-11-2013
thầy cho em hỏi tại sao nghiệm pháp rượu lại phải sử dụng huyết tương giàu tiểu cầu ạ?em cảm ơn
RE: NGHIỆM PHÁP ETHANOL HOẶC PROTAMIN SULPHATE ĐỂ PHÁT HIỆN FIBRIN MONOMERS - phuhmtu - 12-13-2013
tiểu cầu để tham gia vào quá trình chuyển fibrinogen thành fibrin hòa tan