04-02-2018, 11:21 AM
XÁC ĐỊNH KHÁNG NGUYÊN Mi^a CỦA HỆ NHÓM MÁU MNS
(Kỹ thuật gelcard)
Determination Mia antigen of MNS system
I. NGUYÊN LÝ
Kỹ thuật xác định kháng nguyên Mia của hệ nhóm máu MNS bằng ký thuật gelcard được dựa trên nguyên lý của phản ứng ngưng kết cột gel, sử dụng thuốc thử kháng globulin người (huyết thanh Coombs) để xác định sự có mặt của kháng thể chống Mia loại IgG đã được cảm nhiễm trên bề mặt hồng cầu của những cá thể mang kháng nguyên Mia [1], [2].
II. CHỈ ĐỊNH
Xác định kháng nguyên Mia của hệ MNS: Được chỉ định giống như chỉ định xác định kháng nguyên C của hệ Rh (Kỹ thuật ống nghiệm) [4].
III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Không có chống chỉ định.
IV. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện
Bác sỹ, cử nhân, kỹ thuật viên, điều dưỡng trung học.
2. Phương tiện
2.1. Trang thiết bị, dụng cụ, vật tư tiêu hao
- Trang thiết bị: Máy ủ, máy ly tâm, máy đọc gelcard chuyên dụng; máy ly tâm ống thẳng có số vòng chính xác; tủ lạnh đựng sinh phẩm..
- Dụng cụ: ông nghiệm thủy tinh (12x75 mm); giá cắm ống nghiệm; khay men hình chữ nhật; pipette nhựa; pipette tự động; đầu côn các loại; hộp đựng đầu côn; giá nhựa để gelcard; bút marker viết nhãn.
2.2. Thuốc thử và hoá chất
- Kháng huyết thanh Anti-Mia loại IgG; nước muối sinh lý 0,9%; nước cất.;
- Tấm gelcard AHG loại IgG, dung dịch pha hồng cầu (Đệm Liss) để làm xét nghiệm trên gelcard.
2.3. Mẫu máu để xác định kháng nguyên Mia của hệ MNS
Gồm một ống máu tĩnh đã mạch được chống đông bằng EDTA: 2 ml.
3. Thời gian làm xét nghiệm: 60 phút
V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1. Chuẩn bị dụng cụ, hoá chất, sinh phẩm, trang thiết bị đầy đủ trước khi làm xét nghiệm.
2. Nhận mẫu máu và phiếu yêu cầu xác định kháng nguyên Mia, kiểm tra và đối chiếu các thông tin trên mẫu máu cần xác định kháng nguyên Mia với phiếu yêu cầu xét nghiệm. Kiểm tra về số lượng và chất lượng mẫu máu.
3. Tiến hành xác định kháng nguyên Mia của hệ nhóm máu MNS
Bước 1: Chuẩn bị dung dịch hồng cầu cần xác định kháng nguyên Mia 1% (1000 pl dung dịch pha loãng hồng cầu và 10 pl hồng cầu khối của người bệnh hoặc người cần xác định kháng nguyên Mia);
Bước 2: Ghi nhãn đầy đủ thông tin của người cần xác định kháng nguyên Mia lên trên cột gel của tấm gelcard.
Bước 3: Mở tấm bảo vệ phủ trên các cột gel theo đúng quy định;
Bước 4: Nhỏ 50 pl dung dịch hồng cầu người bệnh hoặc người hiến máu 1% đã được chuẩn bị ở bước 1 vào cột gel đã được ghi nhãn (bước 2);
Bước 5: Thêm 25 pl thuốc thử anti Mia vào cột gel tương ứng đã được nhỏ hồng cầu ở bước 4;
Bước 6: Ủ tấm gelcard ở điều kiện nhiệt độ 37oC trong vòng 15 phút trên máy ủ gelcard chuyên dụng;
Bước 7: Hết giai đoạn ủ, ly tâm tấm gelcard trên máy ly tâm gelcard chuyên dụng trong 10 phút;
Bước 8: Đọc kết quả trên máy đọc gelcard chuyên dụng theo phần mềm đã được cài đặt và theo hướng dẫn của nhà sản xuất;
Bước 9: Lưu kết quả vào file kết quả của phần mềm máy tính chuyên dụng và sổ kết quả xác định kháng nguyên nhóm máu;
VI. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
- Phản ứng ngưng kết: Có kháng nguyên Mia trên bề mặt hồng cầu.
- Phản ứng không ngưng kết: Không có kháng nguyên Mia trên hồng cầu. Những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm:
- Giống như những điểm cần chú ý khi làm xét nghiệm xác định kháng nguyên C của hệ Rh [3], [4].
- Làm đúng hướng dẫn sử dụng anti-Mia loại IgG của nhà sản xuất [2].
VII. TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Denise M Harmening (1999) Modem blood banking and transfusion practices, fourth edition, Book Promotion & Service Co., LTD.
2. Hướng dẫn sử dụng anti Mia loại IgG.
3. Thông tư 26/2013/TT- BYT đã được ban hành ngày 16/9/2013 về “Hướng dẫn hoạt động truyền máu”.
Hướng dẫn quy trình kỹ thuật khám bệnh, chữa bệnh chuyên ngành Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Di truyền - Sinh học phân tử, Bộ Y tế, Nhà xuất bản Y học, năm 2014.
Nguồn: Quyết định 3336/QĐ-BYT ngày 20/7/2017 của Bộ trưởng Bộ Y tế về việc ban hành tài liệu Hướng dẫn quy trình kỹ thuật Huyết học - Truyền máu - Miễn dịch - Di truyền - Sinh học phân tử.