11-01-2012, 01:27 PM
Công thức bạch cầu.
1.Nguyên tắc:
Máu ngoại vi có 5 loại bạch cầu trưởng thành là: BC đa nhân trung tính, BC ưa acid, BC ưa Bazo, Mono, Lympho và loại stab(bạch cầu đũa).
Tiến hành đếm tỉ lệ các loại bạch cầu trên 100-200 bạch cầu.(tỉ lệ các loại bc trong tổng số bạch cầu đến được).
2.Chuẩn bị:
dụng cụ lấy máu tĩnh mạch, mao mạch
lam kính, lam kéo.
Giá nhuộm, ống pha thuốc nhuộm
hóa chất: cồn 90(hoặc cồn tuyệt đối). Giemsa gốc, nước cất hoặc dung dịch đệm
bệnh phẩm, bệnh nhân.
3.Kỹ thuật.
(1)Lấy máu, tiến hành kéo lam có thể máu đã chống đông hoặc không chống đông. Để khô hoàn toàn.
(2)Cố định bằng cồn 90, để khô hoàn toàn.(lưu ý không được sử dụng cồn dưới 90 vì cồn dưới 90 có nhiều nước,sẽ không cố định được tiêu bản).
(3)Nhuộm giemsa: 1 thì hoặc 2 thì.
- 1thì: pha 1 giemsa gốc với 9 nước cất(tỉ lệ 1/9), sau đó phủ lên tiêu bản,để 15 phút.
- 2 thì: phủ giemsa gốc lên tiêu bản, để 1 phút. Sau đó rửa đuổi bằng nước. Tiếp tục phủ giemsa pha lên(như nhuộm 1 thì), để 7 phút, rồi rửa đuổi.
Chú ý: khi nhuộm không được để tiêu bản khô vì sẽ tạo cặn trên tiêu bản nhuộm
khi lấy giemsa gốc tránh làm đục. Có thể thay thế nước cất bằng dung dịch đệm.
(4)Soi trên vật kính dầu.
(5)Nhận định kết quả:
+ BC ưa acid: nguyên sinh chất màu da cam, có hạt đặc hiệu to, đều. Nhân thường chia 2 đoạn như mắt kính, màu tím đỏ. Kích thước 10-15 um.
(6)
+ BC đa nhân trung tính: nguyên sinh chất màu hồng, có hạt đặc hiệu nhỏ, đều, màu hồng. Nhân chia từ 2-5 đoạn, chủ yếu 3 đoạn.
+ BC ưa bazo:nguyên sinh chất có hạt đặc hiệu, to nhỏ không đều nên rất thưa thớt, có thẻ nằm đè lên nhân, màu đen. Nhân dính với nhau, không tách rời.(trên thực hành hiếm gặp ở người bình thường).
+ mono: nguyên sinh chất rộng, màu xanh xám, có hạt, đôi khi chứa cả không bào. Nhân to hình hạt đậu, móng ngựa, bầu dục, quả táo,... màu tím đỏ.
+ stab: nhân mảnh, gọn, thắt eo, có hạt đặc hiệu màu hồng.
(7)Tỉ lệ bạch cầu bình thường:
stab: 1-4%
trung tính 41-74%
lympho 20-49%
ưa acid 0-8%
ưa bazo 0-1%
mono 3-7%
1.Nguyên tắc:
Máu ngoại vi có 5 loại bạch cầu trưởng thành là: BC đa nhân trung tính, BC ưa acid, BC ưa Bazo, Mono, Lympho và loại stab(bạch cầu đũa).
Tiến hành đếm tỉ lệ các loại bạch cầu trên 100-200 bạch cầu.(tỉ lệ các loại bc trong tổng số bạch cầu đến được).
2.Chuẩn bị:
dụng cụ lấy máu tĩnh mạch, mao mạch
lam kính, lam kéo.
Giá nhuộm, ống pha thuốc nhuộm
hóa chất: cồn 90(hoặc cồn tuyệt đối). Giemsa gốc, nước cất hoặc dung dịch đệm
bệnh phẩm, bệnh nhân.
3.Kỹ thuật.
(1)Lấy máu, tiến hành kéo lam có thể máu đã chống đông hoặc không chống đông. Để khô hoàn toàn.
(2)Cố định bằng cồn 90, để khô hoàn toàn.(lưu ý không được sử dụng cồn dưới 90 vì cồn dưới 90 có nhiều nước,sẽ không cố định được tiêu bản).
(3)Nhuộm giemsa: 1 thì hoặc 2 thì.
- 1thì: pha 1 giemsa gốc với 9 nước cất(tỉ lệ 1/9), sau đó phủ lên tiêu bản,để 15 phút.
- 2 thì: phủ giemsa gốc lên tiêu bản, để 1 phút. Sau đó rửa đuổi bằng nước. Tiếp tục phủ giemsa pha lên(như nhuộm 1 thì), để 7 phút, rồi rửa đuổi.
Chú ý: khi nhuộm không được để tiêu bản khô vì sẽ tạo cặn trên tiêu bản nhuộm
khi lấy giemsa gốc tránh làm đục. Có thể thay thế nước cất bằng dung dịch đệm.
(4)Soi trên vật kính dầu.
(5)Nhận định kết quả:
+ BC ưa acid: nguyên sinh chất màu da cam, có hạt đặc hiệu to, đều. Nhân thường chia 2 đoạn như mắt kính, màu tím đỏ. Kích thước 10-15 um.
(6)
+ BC đa nhân trung tính: nguyên sinh chất màu hồng, có hạt đặc hiệu nhỏ, đều, màu hồng. Nhân chia từ 2-5 đoạn, chủ yếu 3 đoạn.
+ BC ưa bazo:nguyên sinh chất có hạt đặc hiệu, to nhỏ không đều nên rất thưa thớt, có thẻ nằm đè lên nhân, màu đen. Nhân dính với nhau, không tách rời.(trên thực hành hiếm gặp ở người bình thường).
+ mono: nguyên sinh chất rộng, màu xanh xám, có hạt, đôi khi chứa cả không bào. Nhân to hình hạt đậu, móng ngựa, bầu dục, quả táo,... màu tím đỏ.
+ stab: nhân mảnh, gọn, thắt eo, có hạt đặc hiệu màu hồng.
(7)Tỉ lệ bạch cầu bình thường:
stab: 1-4%
trung tính 41-74%
lympho 20-49%
ưa acid 0-8%
ưa bazo 0-1%
mono 3-7%
khóc trong bóng tối
