[TH] Kỹ thuật pha chế một số môi trường nuôi cấy vi khuẩn

[tuyenlab]

- môi trường Mueller Hinton pha chế như thế nào, thưa thầy
- trong tính chất sinh vật hóa học của cầu khuẩn gram am: não mô cầu và cầu khuẩn lậu có tính chất lên men đường mannit. để xác định tính chất này ta phải cấy vào môi trường nào ạ?
em cần câu trả lời ngay ạ?

- Mueller Hinton thường là môi trường có sẵn, pha theo hướng dẫn trên nhãn hộp. Thành phần gồm: Thịt bò, casein, tinh bột, thạch

- Muốn thử tính chất lên men bất kỳ loại đường nào (trong đó có đường maltose) thường làm như sau:

Dùng môi trường MH (Mueller Hinton) cho thêm đường và chỉ thị màu xanh bromothymol: cho vào ống nghiệm mỗi ống chứa 14 mL môi trường MH đã đun chảy, cho thêm vào ống 0,5 mL đường 30% loại cần xác định. Rồi cho vào mỗi ống 0,14 mL dung dịch xanh bromothymol, sau đó đổ ra đĩa.
Hoà khuẩn lạc vào khoảng 0,5 mL canh thang MH. Dùng que cấy lấy huyền dịch ria dày lên một điểm trên mặt môi trường. Để tủ ấm. Nếu tại nơi cấy môi trường chuyển từ màu xanh sang vàng là (+); vẫn giữ nguyên màu xanh là (-)

[nguyenle0]

Thầy ơjj...cho e hỏj...
Cách điều chế môi trường BA zà môi trường MIU ntn zậy thầy....
E cần câu trả lờj ngay ạk...:'(

[tuyenlab]

Thầy ơjj...cho e hỏj...
Cách điều chế môi trường BA zà môi trường MIU ntn zậy thầy....
E cần câu trả lờj ngay ạk...:'(

BA, MIU là môi trường gì vậy? Dùng để làm gì nhỉ? mình chưa nghe thấy bao giờ?

[Minh Minh]

BA, MIU là môi trường gì vậy? Dùng để làm gì nhỉ? mình chưa nghe thấy bao giờ?
[/quote]

BA là môi trường thạch máu (Blood Agar). Nếu viết đúng là thạch máu cừu (Sheep blood agar).
MIU (Motility Indol Urease) là môi trường thực hiện thử nghiệm di động (Moltility), sinh Indol và sinh urease để định danh vi khuẩn

[win1985]

BA, MIU là môi trường gì vậy? Dùng để làm gì nhỉ? mình chưa nghe thấy bao giờ?

BA là môi trường thạch máu (Blood Agar). Nếu viết đúng là thạch máu cừu (Sheep blood agar).
MIU (Motility Indol Urease) là môi trường thực hiện thử nghiệm di động (Moltility), sinh Indol và sinh urease để định danh vi khuẩn
[/quote]

BA là môi trường để chế thách máu hoặc là Chocolate .( môi trường thachdinh dưỡng thêm 5% máu cuu hoặc là máu thỏ)
Thạch máu này mình đùng để nuôi cấy những vi khuẩn có khả năng tan máu hoặc là những vi khuẩn khó mọc ở moi trường thường như LIÊN CẦU TAN MÁU, PHẾ CẦU, NÃO MÔ CẦU, LẬU CẦU,HEMOPHILUS.. ....Thường thì công thức pha nhà sản xuất ghi cụ thể trên hộp. BA của BIo rad thì 4g trong 100ml nước cất. Sau khi cân 4g BA chúng ta hoà tan vào 100ml nước cất chứa trong bình nón V=250ml.Sau đó Autoclave duy trì ở nhiệt đọ 110-120 độ C(1-1,2 at) trong vòng 15 phút. Sau khi hấp xong thì bạn để cho nguội ( khoảng 40-50 0C)
rồi cho 5ml máu cừu hoặc thỏ vào( chế trong V=100ml), sau đổ đổ ra dĩa thạch và sử dụng.( trước khi sử dụng phải cho vào tủ ấm 37oC)

---

còn kiểm tra tính di động vi khuẩn thì nên dùng thạch mềm= canh thang + 0,5% Agar
indol thì thì có môi trường pepton
urease thì có test rồi bạn

[tuyenlab]

Hỏi tắt vậy mình đâu biết, thạch máu thì gọi luôn là thạch máu hặoc viết rõ ra, viết thế mình không làm vi sinh đâu biết được. Còn cách pha ở trên có rồi đó:

1. Thạch máu
Công thức:
- Thạch thường: 250 mL.
- Máu thỏ hoặc máu cừu: 15 ml

Pha chế:

- Chuẩn bị đủ dụng cụ: Bơm kim tiêm 20 mL vô khuẩn, ống nghiệm vô khuẩn, đĩa petri, đèn cồn và chất chống đông.

- Đun nóng chảy 250 mL môi trường thạch thường đựng trong bình cầu, để nguội 50oC.

- Lấy 15 mL máu từ tim thỏ hoặc từ ống đã có sẵn cho vào bình thạch trên ngọn lửa đèn cồn.

- Lắc nhẹ bình cầu cho máu hoà đều trong môi trường.

- Đổ môi trường vào đĩa petri hoặc ống nghiệm, để ống nằm nghiêng cho thạch đông.

Hoặc pha bằng môi trường có sẵn của nhà sản xuất (theo hướng dẫn trên nhãn hộp)


2. Môi trường Ure indol:
Công thức:
- L.Tryptophan 3 g.
- Kali dihydrophosphat (K H2PO4) 1 g.
- Dikalihydrophosphat (K2HPO4) 1 g.
- Natri clorid 5 g.
- Urê 20 g.
- Dung dịch đỏ phenol 1% trong nước 2 mL.
- Nước cất 1000 mL

Pha chế:
- Chuẩn bị đủ dụng cụ: ống đong, cân, pipet, đèn cồn, ống nghiệm, máy lọc Seitz.
- Chuẩn bị đủ các loại hoá chất cần thiết để pha chế.
- Pha dung dịch đỏ phenol: hoà 0,25 g đỏ phenol trong 50 mL cồn 90o rồi thêm 50 mL nước cất.
- Cân đong đủ các thành phần của môi trường vào bình cầu.
- Đun nóng 50-60oC để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH=7,2 rồi thêm dung dịch đỏ phenol
- Lọc qua máy lọc Seitz rồi đóng vào ống nghiệm vô khuẩn,mỗi ống 1-2 mL (nếu không có lọc Seitz thì không lọc cũng được, nhưng phải pha chế vô khuẩn hoặc có thể hấp 75oC 1 giờ, hôm sau 60oC 30phút.

[nguyenminh]

thầy ơi.tác dụng của các thành phần viet tăt trog mt TCBS -thiosulfate citrate bile saltf la gì vây thầy?