(12-09-2014, 12:09 AM)0933553178 Đã viết: ai có quy trình phân lập phẩy khuẩn tả cho e xin với ạ. E xin cảm ơn
1. Chuẩn bị phương tiện
1.1. Dụng cụ
Lam kính, lamen sạch, pipet.
Lọ vô khuẩn.
Các dụng cụ nhuộm gram.
Que cấy, đèn cồn.
1.2. Hóa chất
Nước muối sinh lý.
Các loại thuốc nhuộm gram.
Kháng huyết thanh đa giá và đơn giá.
Các loại thuốc thử, giấy thử.
1.3. Môi trường
Môi trường bảo quản Carry Blair.
Môi trường tăng sinh: pepton kiềm.
Môi trường phân lập: thạch kiềm, TCBS.
Môi trường canh thang.
Môi trường sinh vật hóa học.
1.4 Bệnh phẩm
Bệnh phẩm là phân hoặc chất non của bệnh nhân được đựng trong lọ vô khuẩn. Nếu bệnh nhân chết, mổ tử thi lấy dịch ruột non hoặc dịch mật.
2. Tiến hành phân lập 2.1. Quy trình phân lập
1. Chuẩn bị đủ phương tiện cần thiết để tiến hành phân lập.
2. Làm tiêu bản soi tươi dưới kính hiển vi, vật kính 40x.
3. Nhuộm gram bệnh phẩm để sơ bộ nhận xét hình thể vi khuẩn.
4. Cấy bệnh phẩm trực tiếp hoặc từ Môi trường bảo quản vào Môi trường pepton kiềm, để tủ ấm 370 C trong 3-6 giờ.
5. Nếu trên Môi trường pepton có váng thì nhuộm soi, nếu là phẩy khuẩn thì tiếp tục cấy sang ống thứ 2,3.
6. Đồng thời cấy chuyển từ Môi trường pepton kiềm sang thạch kiềm, TCBS. Để tủ ấm 370 C/ 24 giờ.
7. Nhận xét hình thể khuẩn lạc, chọn khuẩn lạc cấy sang Môi trường sinh vật hóa học, để 370 C/ 24 giờ.
8. Làm phản ứng ngưng kết trên lam kính với Kháng huyết thanh đa giá và đơn giá của phẩy khuẩn tả.
9. Đọc kết quả, kết luận: : glucose (+), lactose (-), H2S (-), urease (-), di động (+), indol (+), manose (+), citrat simmons (+),oxydase (+), saccharose (+), arabinose (-).