[TH] Kỹ thuật nhuộm Hóa học tế bào

[tuyenlab]

4.1. Nhuộm Peroxydase (Phương pháp cải tiến của Nguyễn Văn Tính):

4.1.1. Cơ chế: Dưới tác dụng của peroxydase, hydrogen peroxid (H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]) sẽ giải phóng ra một oxy nguyên tử, oxy hoá cơ chất (benzidin) tạo chất tủa màu tương ứng trong bào tương bạch cầu:

4.1.2. Pha dung dịch benzidin 0,1%:

- Benzidin : 100mg

- Cồn tuyệt đối :10ml

- Nước cất vừa đủ 100ml

- Ô xy già [sub] [/sub](30 thể tích): vài giọt

Lắc đều, bảo quản ở nhiệt độ phòng xét nghiệm. Lắc trước khi sử dụng.

4.1.3. Quy trình nhuộm:

- Ngâm tiêu bản trong cồn formol 10%: 10 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 30 giây, để khô tự nhiên.

- Nhuộm benzidin 1% : 2 - 3 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 1 phút, để khô tự nhiên.

- Nhuộm giemsa 1/10 : 10-12 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 1 phút, để khô.

4.1.4. Đọc kết quả:

Phương pháp nhuộm này cho các hạt dương tính màu vàng xỉn (gỉ sắt) trong bào tương tế bào. Tính số lượng tế bào dương tính trong tổng số 100 tế bào cần xem xét. Đối với leukemia cấp thì đó là 100 tế bào blast. Người ta chỉ quan sát để có nhận xét chung về mức độ dương tính chứ không cần thiết tính score trong phương pháp nhuộm peroxydase.