[TH] Kỹ thuật nhuộm Hóa học tế bào

[tuyenlab]

4.6. Nhuộm Perls

4.6.1. Cơ chế:

Trong môi trường acid, ion sắt của ferritin (Fe[sup]+++[/sup]) sẽ tác dụng với ferrocyanide tạo ra ferric ferrocyanide có màu xanh phổ (xanh cobalt đậm).

4.6.2. Pha dung dịch nhuộm:

Trộn lẫn hai dung dịch sau theo tỷ lệ 1/2:

- Acid HCl 2% : 01 thể tích.

- Dung dịch Potasium Ferrocyanide (K[sub]4[/sub]FeCN[sub]6[/sub] . 3H[sub]2[/sub]O) 2% : 02 thể tích.

4.6.3. Kỹ thuật:

- Tiêu bản máu, tuỷ cố định bằng cồn metylic : 10 phút

- Rửa tiêu bản, để khô

- Nhuộm trong dung dịch nhuộm : 30 phút

- Rửa tiêu bản

- Nhúng trong acid HCl 1%,

- Rửa tiêu bản

- Nhuộm nhân bằng dung dịch Kernetrot : 12 phút

- Rửa tiêu bản

- Tiêu bản máu, tuỷ để khô & đọc kết quả

4.6.4. Đọc kết quả:

Các tế bào dương tính có hạt hoặc cục màu xanh phổ trong bào tương. Tính score trong tổng số 100 tế bào hồng cầu trưởng thành hoặc nguyên hồng cầu. Ngoài ra, cần tính tỷ lệ phần trăm tế bào nguyên hồng cầu sắt vòng.