[TH] Kỹ thuật nhuộm Hóa học tế bào

[tuyenlab]

4.2. Nhuộm sudan đen

4.2.1. Cơ chế: Chất màu sudan đen có thuộc tính hoà tan trong lipid, người ta lợi dụng đặc điểm này để phát hiện thành phần lipid có trong tế bào.

4.2.2. Pha dung dịch sudan:

(1) : Sudan đen B : 0,1g

Cồn 96[sup]0[/sup] : 30ml

(2): Dung dịch Phenol :

Dung dịch phenol : 2,96ml

Na[sub]2[/sub]HPO[sub]4 [/sub]. 12 H[sub]2[/sub]O : 0,06g

Cồn 96[sup]0[/sup] : 6ml

Nước cất : 20ml

Trộn (1) và (2)

4.2.3. Quy trình nhuộm:

- Cố định tiêu bản bằng hơi focmol: 10 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 30 giây, để khô tự nhiên.

- Nhuộm Sudan: 25 phút.

- Nhúng cồn 70[sup]0[/sup]: 1/ 2-1 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 30 giây, để khô tự nhiên.

- Nhuộm giemsa 1/10: 12 phút.

- Rửa dưới vòi nước chảy 1 phút, để khô.

4.2.4. Đọc kết quả:

Các tế bào dương tính chứa các hạt, cục màu đen trong bào tương và thường chờm lên nhân, có khi che kín cả tế bào. Cách đọc kết quả giống như phương pháp nhuộm peroxydase.