[TH] Kỹ thuật pha chế một số môi trường nuôi cấy vi khuẩn

[tuyenlab]

4.2. Môi trường urê indol

Công thức:
- L.Tryptophan 3 g.
- Kali dihydrophosphat (K H2PO4) 1 g.
- Dikalihydrophosphat (K2HPO4) 1 g.
- Natri clorid 5 g.
- Urê 20 g.
- Dung dịch đỏ phenol 1% trong nước 2 mL.
- Nước cất 1000 mL

Pha chế:
- Chuẩn bị đủ dụng cụ: ống đong, cân, pipet, đèn cồn, ống nghiệm, máy lọc Seitz.
- Chuẩn bị đủ các loại hoá chất cần thiết để pha chế.
- Pha dung dịch đỏ phenol: hoà 0,25 g đỏ phenol trong 50 mL cồn 90o rồi thêm 50 mL nước cất.
- Cân đong đủ các thành phần của môi trường vào bình cầu.
- Đun nóng 50-60oC để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH=7,2 rồi thêm dung dịch đỏ phenol
- Lọc qua máy lọc Seitz rồi đóng vào ống nghiệm vô khuẩn,mỗi ống 1-2 mL (nếu không có lọc Seitz thì không lọc cũng được, nhưng phải pha chế vô khuẩn hoặc có thể hấp 75oC 1 giờ, hôm sau 60oC 30phút.
- Nhận xét kết quả: Môi trường có màu đỏ tươi.

[tuyenlab]

4.3. Môi trường Manit di động

Công thức:
- Pepton 20 g
- Kali nitrat 1 g
- Mannitol 10 g
- Dung dịch đỏ phenol 1% trong nước. 4 mL
- Thạch 4 g
- Nước cất. 1000 mL

Pha chế:

- Chuẩn bị đủ dụng cụ: Pipet, ống nghiệm , ống đong, bình cầu, cân.
- Chuẩn bị đủ các loại hoá chất cần thiết để pha chế môi trường.
- Cân đong đủ các thành phần của môi trường cho vào bình cầu.
- Đun sôi quấy đều để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH=7,6
- Cho dung dịch đỏ phenol.
- Đóng vào ống 12 mm, mỗi ống khoảng 3 mL.
- Hấp 110oC trong 30 phút, bỏ ra để ống đứng.
- Nhận xét kết quả: Môi trường mềm, có màu hồng đỏ.

[tuyenlab]

4.5. Môi trường Clark- Lubs

Công thức:
- Pepton 5 g
- Dikalihydrophosphat (K2HOP4) 5 g
- Glucose 5 g
- Nước cất 1000mL

Pha chế:
- Chuẩn bị đủ dụng cụ: Pipet, ống nghiệm , ống đong, bình cầu, cân, giấy lọc.
- Chuẩn bị đủ các loại hoá chất cần thiết để pha chế môi trường.
- Cân, đong đủ các thành phần của môi trường cho vào bình cầu.
- Đun sôi để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH=7,5
- Lọc qua giấy lọc
- Đóng vào ống 12 mm, mỗi ống khoảng 3 mL.
- Hấp 110oC trong 30 phút.
- Nhận xét kết quả: Môi trường trong hơi hanh vàng

[tuyenlab]

4.6. Môi trường Basiekow

Công thức:
- Cao thịt 5 g
- Pepton 10 g
- Natri clorid tinh khiết 5 g
- Dung dịch xanh bromothymol 1,5% trong cồn 15 mL.



Pha chế:
- Chuẩn bị đủ dụng cụ: Pipet, ống nghiệm , ống đong, bình cầu, cân, giấy lọc, đèn cồn.
- Chuẩn bị đủ cácloại hoá chất cần thiết để pha chế.
- Cân đong đủ các thành phần của môi trường cho vào bình cầu.
- Đun nóng, quấy đều để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH
- Cho dung dịch xanh bromothymol vào bình cầu.
- Lọc qua giấy lọc, đóng vào ống 12 mm, mỗi ống 3 mL và 1 ống hơi để kiểm tra tính chất sinh hơi (ống duham)
- Hấp 110oC trong 30 phút.
- Nhận xét kết quả: Môi trường có mầu xanh lá cây


Nồng độ các dung dịch đường cần phải pha để dùng với môi trường Basiekow.
+ Đường mannit 20%
+ Đường lactose 20%.
+ Đường glucose 20%
+ Đường mannose 20%.
+ Đường mantose 30%
+ Đường ramnose 10%.
+ Đường saccharose 30%
+ Đường arabinose 30%.

[tuyenlab]

4.7. Môi trường Citrat simmons

Công thức:
- NaCl 5 g
- Manesi sulfat 0,2 g
- Amoni hydrophosphat(NH4)2HPO4 1 g
Dikalihydrophosphat (K2HPO4) 1g
- Natri citrat 2g
- Thạch sợi 20 g
- Dung dịch xanh bromothymol 1,5% trong cồn 900 10 mL
- Nước cất vừa đủ 1000 mL

Pha chế:
- Chuẩn bị đủ dụng cụ: Pipet, ống nghiệm, ống đong, bình cầu, cân
- Chuẩn bị đủ các loại hoá chất cần thiết.
- Cân đong đủ các thành phần của môi trường cho vào bình cầu.
- Đun sôi nhỏ lửa , khuấy đều để hoà tan các chất.
- Điều chỉnh pH
- Cho dung dịch xanh bromothymol
- Đóng vào ống 12 mm, mỗi ống 3 mL.
- Hấp 110oC trong 30 phút, đem ra để nghiêng.
- Nhận xét kết quả: Môi trường có màu xanh lá cây, phần lưỡi dài 5-6cm

[bqkiet]

Môi trường này sao thấy lạ vậy, không biết là có loại chuẩn bị sẵn ko?

[tuyenlab]

Môi trường này sao thấy lạ vậy, không biết là có loại chuẩn bị sẵn ko?

Không có gì là lạ cả, do bạn bán môi trường có sẵn nên không biết vậy thôi, thực chất thành phần hoàn toàn giống nhau. Để tiết kiệm chi phí nên chúng tôi phải pha thay vì mua sẵn như đơn vị các bạn bán.

[Tạ Thu]

1.3. Thạch thường

Công thức:
- Nước thịt: 1000 mL (có thể thay bằng 5 g cao thịt).
- Pepton bột: 10 g.
- NaCl tinh khiết: 5 g.
- Thạch sợi: 20 g.

Pha chế:

- Chuẩn bị đủ đĩa petri, ống nghiệm, ống đong, bình cầu, cân, giấy lọc, đèn cồn, nồi nhôm và các loại hoá chất.

- Cân, đong đủ nước thịt và các thành phần của môi trường vào nồi, đun nóng cho tan.

- Điều chỉnh pH 7,8- 8 bằng dung dịch kiềm hoặc acid.

- Cho thạch sợi đã rửa sạch cắt nhỏ vào nồi

- Hấp 120C/30phút.

- Kiểm tra lại pH 7,4- 7,6.

- Lọc qua giấy lọc hoặc bông vào bình cầu khi môi trường còn nóng.

- Hấp 110C 30 phút.

- Đổ đĩa hoặc ống nghiệm khi nhiệt độ khoảng 500C.

Nhận xét kết quả:
Thạch tan đều, môi trường không cứng hoặc quá mềm, đĩa thạch không dày quá hoặc mỏng quá. ống thạch phải có phần chân
và lưỡi.

thầy ơi cho em hỏi tại sao phải có bước điều chỉnh Ph 7,8 đến 8 trước sau lại điều chỉnh Ph tiếp mà không thực hiện mỗi bước điều chỉnh Ph lúc sau thôi ạ.

[tuyenlab]

thầy ơi cho em hỏi tại sao phải có bước điều chỉnh Ph 7,8 đến 8 trước sau lại điều chỉnh Ph tiếp mà không thực hiện mỗi bước điều chỉnh Ph lúc sau thôi ạ.

Cái này là để tránh pH làm ảnh hưởng đến môi trường khi cho thạch sợi vào hấp. pH quá acid hoặc kiềm sẽ làm biến tính môi trường mất.

[hoaithuong1992]

- môi trường Mueller Hinton pha chế như thế nào, thưa thầy
- trong tính chất sinh vật hóa học của cầu khuẩn gram am: não mô cầu và cầu khuẩn lậu có tính chất lên men đường mannit. để xác định tính chất này ta phải cấy vào môi trường nào ạ?
em cần câu trả lời ngay ạ?