[TH] Kỹ thuật xác định các alcaloid chính của thuốc phiện

[tuyenlab]

1. Nguyên tắc:

Alcaloid độc của Thuốc phiện trong các mẫu thử được chiết tách từ cắn B qua các phản ứng màu, test thử nhanh, sắc ký lớp mỏng, đo quang phổ UV.

2. Quy trình kỹ thuật:

2.1 Chuẩn bị:

- Dụng cụ: Khay sứ, đũa thuỷ tinh, Bản mỏng Silicagel G hoặc 60GF254, Bình triển khai sắc ký, đầu côn nhỏ, đầu phun sương, quả bóp, máy sấy, máy đo UV, test thử nhanh ma tuý.
- Hoá chất: Acid acetic 2%, Thuốc thử Frohde, Marqui, HNO­[sub]3[/sub] đặc, FeCl[sub]3[/sub] 10%, Toluen, Aceton, Ethanol, Amoniac, Methanol, H[sub]2[/sub]SO[sub]4[/sub] 10%, Dragendoff…
- Mẫu thử: Mẫu thử được chiết theo quy trình chung bằng Ether.

2.2 Tiến hành.


2.2.1 Phản ứng màu:
- Cho vào khay sứ 2-3 giọt cặn chiết B, sấy khô. Acid hoá bằng acid acetic 2% sau đó cho phản ứng với 1 sồ thuốc thử theo bảng sau:

[table=95]FrohdeMarquiMarquiFeCl3 10%MorphinTímĐỏ tímĐỏXanhCodeinKhông màuĐỏ tímKhông màuKhông màuHeroinTímĐỏ tímVàngKhông màuPapaverinHồngĐỏ hồngNacotinXanh lụcTím

2.2.2 Que thử nhanh (test thử) áp dụng cho nước tiểu. - Lấy nước tiểu vào trong chén( khoảng ¼ chén) - Xé bao đựng que thử. - Đặt que thử vào chén đựng nước tiểu chú ý đặt đúng chiều mũi tên chỉ xuống và mặt nước tiểu không vượt quá vạch dưới mũi tên. - Chờ 5 phút đọc kết quả. Kết quả: - Nếu chỉ có 1 vạch hồng tại khu vực “C” , kết quả này chứng tỏ nồng độ opiat 300ng/mL hoặc cao hơn. Nghĩa là có sử dụng ma tuý (dương tính). - Nếu có cả 2 vạch ở khu vực “C” và “T” chứng tỏ nồng độ opiat dưới 300ng/mL nghĩa là không sử dụng ma tuý (âm tính).
2.2.2 Sắc ký lớp mỏng.

- Pha dung môi khai triển Toluen- Aceton- Ethanol- Amoniac với tỉ lệ tương đương 45:45:7:3 hoặc Methanol- Aminiac tỉ lệ 49:1. Lắc đều rồi đổ vào bình triển khai (chú ý đổ 1 lượng không quá 1cm chiều cao trong bình triển khai) đậy nắp lại để dung môi hoà trộn đều trước khi đặt bản sắc ký vào ít nhất 15 phút.

- Dùng đầu côn nhỏ chấm khoảng 15µL mẫu thử lên bản mỏng. Đồng thời chấm mẫu chuẩn đối chiếu cách mẫu thử khoảng 1cm. Chú ý chấm cách mép dưới bản mỏng khoảng 1cm và vết chấm càng gọn càng tốt, vừa chấm vừa sấy khô.

- Đặt bản mỏng vào trong bình triển khai đã có sẵn dung môi ở trên. Chờ dung môi ngấm dần lên tới khi cách mép trên 1cm nhấc bản mỏng ra. Có thể để khô tự nhiên hoặc sấy khô.

- Soi qua đèn tử ngoại để nhận biết sơ bộ.

- Phun thuốc thủ hiện màu là Dragendoff bằng đầu phun hơi sương. Sau đó tăng độ nhậy bằng acid sulfuric 10%.. Để khô tự nhiên hoặc sấy khô.

Kết quả: mẫu thử cho các vết màu vàng cam và có Rf tương đương mẫu chuẩn

Hình ảnh sắc ký đồ của thuốc phiện B1: mẫu thử, Mor: Morphin, Co: Codein, He: Heroin, Na: Nacotin, Pa: papaverin