11-26-2015, 12:01 PM
NHUỘM MUCICARMIN (MEYER)
I. NGUYÊN LÝ:
Phương pháp nhuộm nhằm phát hiện chất nhầy từ biểu mô.
II. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện
+ Kỹ thuật viên giải phẫu bệnh – tế bào bệnh học: 02
2. Phương tiện, hóa chất
2.1. Phương tiện, hóa chất chung
- Dung dịch cố định bệnh phẩm.
- Cồn (50o, 70o, 80o, 95o , 100o).
- Xylen hay toluen.
- Nước cất 2 lần.
- Parafin.
- Sáp ong.
- Albumin + glyxerin.
- Máy đo độ pH điện tử.
- Máy chuyển bệnh phẩm tự động.
- Máy đúc khối parafin.
- Bàn hơ dùng điện.
- Máy cắt lát mỏng (microtome).
- Lưỡi dao cắt lát mỏng.
- Lò nấu parafin.
- Tủ ấm 37o và 56o.
- Tủ lạnh.
- Điều hòa nhiệt độ.
- Tủ hốt phòng thí nghiệm.
- Nguồn cấp nước chảy.
- Bể nhuộm bằng thủy tinh.
- Bể thủy tinh đựng cồn, xylen.
- Hộp bằng thép không rỉ đựng parafin.
- Khuôn nhựa.
- Giá đựng tiêu bản (đứng và nằm ngang).
- Cốc đong loại 1000ml, 500ml, 100ml và 50ml.
- Ống hút bằng nhựa, quả bóp cao su hút hóa chất.
- Kẹp không mấu, kéo.
- Cân phân tích.
- Giấy lọc.
- Phiến kính, lá kính.
- Axit picric ngâm, làm sạch phiến kính.
- Bôm Canada hoặc keo gắn lá kính.
- Kính hiển vi 2 mắt để kiểm tra kết quả nhuộm.
- Kính phòng hộ, găng tay các loại, mặt nạ phẫu thuật, áo choàng phẫu thuật.
2.2. Phương tiện, hóa chất riêng biệt cho kỹ thuật
- Carmin.
- AlCl3
- Nước vàng metanil.
- Cồn tuyệt đối hoặc dung dịch sublimat 5%
III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1. Cố định
Bệnh phẩm lấy ra khỏi cơ thể, được cố định ngay trong cồn tuyệt đối hoặc trong dung dịch sublimat 5% trong 5 giờ.
Sau cố định, bệnh phẩm được thực hiện qua các khâu kỹ thuật sau:
2. Chuyển bệnh phẩm
3. Vùi parafin
4. Đúc khối parafin
5. Cắt và dán mảnh cắt
6. Nhuộm mảnh cắt
6.1. Chuẩn bị phẩm nhuộm mucicarmin
* Dung dịch dự trữ
+ Hòa tan 1g carmin và 0,5g AlCl3 khan trong 2ml nước cất bằng cách hâm nóng nhẹ trong 2 phút, khuấy luôn cho đến khi dung dịch sẫm màu.
+ Tiếp tục khuấy và cho thêm từ từ 100ml cồn 50 độ.
+ Để lắng 24 giờ rồi lọc
* Dung dịch dùng
+ Pha loãng dung dịch dự trữ 10 lần bằng nước cất hoặc tốt hơn là pha loãng bằng cồn 50-70 độ.
6.2. Các bước nhuộm
+ Loại parafin như thường lệ.
+ Nhuộm mảnh cắt trong dung dịch mucicarmin pha loãng từ 10-15 phút hay lâu hơn.
+ Rửa nhanh trong nước cất.
+ Loại nước bằng cồn 80, 95 độ, sau đó là cồn tuyệt đối.
+ Làm trong bằng xylen.
+ Gắn lá kính bằng bôm Canada.
IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Chất nhầy màu đỏ.
Theo Quyết định Số: 5199 /QĐ-BYT