3. Coagulase test
- Mục đích: thử nghiệm này xác định sự hiện diện của yếu tố gây đông huyết tương của vi khuẩn (coagulase).
- coagulase có khả năng làm đông huyết tương người và động vật đã được chống đông. Nó hoạt động giống như thrombokinase hình thành một áo fibrinogen trong huyết tương. Có 2 loại coagulase: tự do (được tiết ra môi trường), và cố định (bám cố định vào vách tế bào)
- thực hiện:
+ tách huyết tương thỏ từ máu đã được chống đông.
+ pha huyết tương với nồng độ giống nhau, được chia đều vào 3 ống
+ tiến hành chứng (+): nghiền khuẩn lạc của chủng chuẩn S. aureus ATCC vào 1 ống
+ với bệnh phẩm: chọn khuẩn lạc nghi ngờ, nhiền khuẩn lạc đó vào ống thứ 2.
+ với ống còn lại: chứng (-): không cho thêm gì.
+ để tủ ấm 35 - 37°C , đọc kết quả trong 6 - 8 h
kết quả:
(+) và ống chứng (+): huyết tương đông tụ lại thành khối
(-) và ống chứng (-): không xuất hiện cục đông, dung dịch đồng nhất.
4. Catalase test
- phát hiện enzym catalase gây xúc tác phản ứng: H2O2 → O2 + H2O
- enzym này có mặt ở vi sinh vật hiếu khí, kỵ khí tùy tiện.
- thực hiện:
+ Lấy 1 ăng vi khuẩn hoặc chọn khuẩn lạc nghi ngờ lên trên mặt 1 lam kính sạch.
+ Nhỏ H2O2 30%.
+ quan sát sau 1 - 2s:
nếu có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (+)
nếu không có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (-)
- Mục đích: thử nghiệm này xác định sự hiện diện của yếu tố gây đông huyết tương của vi khuẩn (coagulase).
- coagulase có khả năng làm đông huyết tương người và động vật đã được chống đông. Nó hoạt động giống như thrombokinase hình thành một áo fibrinogen trong huyết tương. Có 2 loại coagulase: tự do (được tiết ra môi trường), và cố định (bám cố định vào vách tế bào)
- thực hiện:
+ tách huyết tương thỏ từ máu đã được chống đông.
+ pha huyết tương với nồng độ giống nhau, được chia đều vào 3 ống
+ tiến hành chứng (+): nghiền khuẩn lạc của chủng chuẩn S. aureus ATCC vào 1 ống
+ với bệnh phẩm: chọn khuẩn lạc nghi ngờ, nhiền khuẩn lạc đó vào ống thứ 2.
+ với ống còn lại: chứng (-): không cho thêm gì.
+ để tủ ấm 35 - 37°C , đọc kết quả trong 6 - 8 h
kết quả:
(+) và ống chứng (+): huyết tương đông tụ lại thành khối
(-) và ống chứng (-): không xuất hiện cục đông, dung dịch đồng nhất.
4. Catalase test
- phát hiện enzym catalase gây xúc tác phản ứng: H2O2 → O2 + H2O
- enzym này có mặt ở vi sinh vật hiếu khí, kỵ khí tùy tiện.
- thực hiện:
+ Lấy 1 ăng vi khuẩn hoặc chọn khuẩn lạc nghi ngờ lên trên mặt 1 lam kính sạch.
+ Nhỏ H2O2 30%.
+ quan sát sau 1 - 2s:
nếu có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (+)
nếu không có bọt khí xuất hiện --> phản ứng (-)