trợ giúp

[m_hanh]

cho mình hỏi diễn đàn không có đăng phương pháp định lượng creatinin trong huyết thanh hay sao mà mình kiếm hoài không thấy

[administrator]

cho mình hỏi diễn đàn không có đăng phương pháp định lượng creatinin trong huyết thanh hay sao mà mình kiếm hoài không thấy

XÉT NGHIỆM SỬ DỤNG PHÉP ĐO 2 ĐIỂM
ĐỊNH LƯỢNG CREATININ TRONG HUYẾT THANH

1. Nguồn gốc và vai trò của creatinin:
Từ 3 acid amin là arginin, glycin, methionin gan và thận (chủ yếu là gan) sẽ tổng hợp thành creatin.
Creatin theo máu tới cơ và được dự trữ tại đây dưới dạng creatin phosphat. Trong quá trình vận cơ liên kết phosphat được giải phóng và creatin chuyển thành creatinin (quá trình này không thuận nghịch )
Creatinin theo máu tới thận và được thận đào thải ra bên ngoài qua nước tiểu. Nếu chức năng đào thải của thận giảm nồng độ creatinin tăng cao trong máu. Vì vậy định lượng ure và creatinin trong máu được coi là 2 xét nghiệm dùng để đánh giá chức năng lọc của thận.

2. Nguyên tắc kỹ thuật:
Việc định lượng Creatinin huyết thanh theo nguyên tắc sau:

NaOH
Creatinin + acid pycric -----------------------> Creatin pycrat
( vàng chanh) (vàng da cam)

Độ đậm mầu đỏ da cam tỷ lệ thuận với nồng độ creatinin trong huyết thanh và được xác định ở bước sóng 500 nm bằng phép đo động học 2 điểm (two point kinetic).

3. Hoá chất:
Dung dịch A: acid pycric 25 mmol/l.
Dung dịch B: NaOH 40mmol/l
Dung dịch creatinin nồng độ chuẩn : 177mol/l
Hoá chất bảo quản ở nhiệt độ 2oC - 8oC bền vững.

4. Tiến hành:

1. Chuẩn bị:
- Dụng cụ: bộ đồ lấy máu tĩnh mạch, ống nghiệm, giá đựng ống nghiệm, pipet tự động, đầu côn, bút ghi kính, máy ly tâm, máy sinh hoá bán tự động.
- Thuốc thử: dùng bộ kit hoá chất mua sẵn gồm: reagent A và B - creatinin, standard - creatinin (creatinin mẫu có nồng độ 177 µmol/l).

2. Lấy máu tĩnh mạch, ly tâm lấy huyết thanh.

3. Hút 250 µL reagent A- cratinin vào ống mẫu và ống thử .

4. Hút 250 µL reagent B - cratinin vào ống mẫu và ống thử .

5. Lắc đều rồi hút 50 µL creatinin mẫu vào ống mẫu

6. Hút 50µL huyết thanh hoặc nước tiểu pha loãng vào ống thử.

7. Lắc đều, đo ngay ở bước sóng 505 nm tại hai điểm : A1 = 30 giây và A2= 90 giây.


5. Nhận định kết quả:
Nồng độ creatinin trong máu bình thường là:
Nam: 62 - 120 µmol/l
Nữ: 53 - 100 µmol/l
Creatinin trong máu tăng gặp trong các bệnh về thận như viêm cầu thận cấp, viêm thận mạn, suy thận hoặc trong các trường hợp ngộ độc cấp.
Ceatinin máu giảm trong các trường hợp suy kiệt, teo cơ, suy gan...

Chú ý: Kỹ thuật này có thể dùng để định lượng creatimin trong nước tiểu với bệnh phẩm là nước tiểu trong pha loãng với nước cất tỷ lệ 1/50, kết quả phải nhân trả lại với hệ số pha loãng (nhân với 50).

[m_hanh]

cảm ơn bạn rất nhiều!!!