[TH] Chẩn đoán vi nấm Candida - Phiên bản có thể in

[TH] Chẩn đoán vi nấm Candida - Phiên bản có thể in

+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Ký sinh trùng (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-72.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-107.html)
+---- Chủ đề: [TH] Chẩn đoán vi nấm Candida (/thread-929.html)

[TH] Chẩn đoán vi nấm Candida - tuyenlab - 12-17-2012

CHẨN ĐOÁN VI NẤM CANDIDA

Có 8 đến 9 loại Candida có khả năng gây bệnh nhưng trên 95% trường hợp là do Candida albicans

1. BỆNH PHẨM

- Rất đa dạng, tuỳ theo dạng bệnh mà ta có những bệnh phẩm khác nhau: mảng trắng trong miệng, đờm, da, móng, dịch âm đạo, mảnh sinh thiết...
- Bệnh phẩm lấy xong phải gửi đến phòng xét nghiệm ngay trong vòng 24h.

2. KHẢO SÁT TRỰC TIẾP

- Dịch âm đạo, mảng trắng trong miệng, đờm, cặn lắng nước tiểu... khảo sát với NaCl 0,9% hoặc phết lam nhuộm Gram.
- Da, móng, mảnh sinh thiết khảo sát với KOH20%
- Mẫu sinh thiết sau khi lấy được bỏ vào dung dịch cố định, xử lý theo phương pháp mô học rồi nhuộm Hematoxylin.
- Khi quan sát dưới kính hiển vi thấy nhiều tế bào hạt men và sợi tơ nấm giả

3. CẤY NẤM

- Các loại bệnh phẩm cấy vào môi trường Sabourauud + Chloramphenicol ủ ở 25oC.
- Mẫu máu cấy vào môi trường BHI ủ 370C trong vòng 10 ngày. sau đó chuyển sang Sabourauud + Chloramphenicol, khuẩn lạc nấm Candida sp có màu trắng nhão.

3.1. Định danh Candida albicans.

3.1.1. Thử nghiệm sinh ống mầm.(Serum test)
Trong ống nghiệm có chứa sẵn 0,5-1ml huyết thanh thỏ, hoà tan một ít khuẩn lạc nấm hoặc bệnh phẩm vào huyết thanh, ủ 37oC trong 4giờ. Lấy một giọt huyết thanh nhỏ lên lam kính rồi quan sát dưới kính hiển vi.
- Nếu thấy có ống mầm: Candida albicans
- Nếu không có ống mầm: Các loại Candida khác

3.1.2. Thử nghiệm tìm bào tử bao dày( Chlamydospore)
Dùng que cấy lấy nấm từ môi trường Sabouraud rồi vạch sâu vào trong thạch bột bắp, thạch khoai tây-cà rốt-mật hai đường song song dài 1,5cm. Đốt que cấy rồi vạch đường zic-zac lên mặt thạch. Đậy lá kính lên đường cấy rồi ủ ở nhiệt độ phòng 48-96 giờ, sau đó quan sát, thấy:
- Nếu thấy tế bào nấm men, sợi tơ nấm giả, bào tử bao dày: Candida albicans
- Nếu thấy tế bào nấm men, sợi tơ nấm giả: Candida khác
- Nếu thấy tế bào nấm men: không phải Candida mà là một loại nấm men khác

3.2. Định tên các loại Candida sp khác

3.2.1. Cấy lên môi trường Sabouraud lỏng:
Hoà tan một ít nấm vào ống Sabouraud lỏng, ủ ở nhiệt độ phòng 1-3ngày.
- Nếu thấy nấm mọc thành lớp váng trên mặt môi trường: là Candida krusei hoặc Candida tropicalis.
- Nếu thấy nấm mọc thành cặn ở đáy môi trường: là Candida khác.

3.2.2. Thử nghiệm lên men đường.
- Dùng 4 ống nghiệm có pepton lỏng, chất chỉ thị màu tím Bromocresol purple(BCP), ống Durham.
- Cho vào mỗi ống một loại đường: Glucose, Maltose, Saccharose, Lactose.
- Cấy nấm vào 4 ống nghiệm nói trên, rồi đổ hỗn hợp dầu parafin-vaselin lên trên để tạo môi trường kỵ khí.
- Ủ 37oC trong vòng 10 ngày.
- Khi lên men, nấm sẽ biến đường thành acid và hơi. Acid làm màu tím của chỉ thị BCP chuyển sang màu vàng. Hơi được sinh ra sẽ bay lên làm hạ mực nước trong ống Durham.

3.2.3. Thử nghiệm đồng hoá đường.
- Cấy nấm vào môi trường dồng hoá.
- Khi môi trường đông thì đặt lên mặt thạch các đĩa giấy có tẩm đường glucose, Maltose, Saccharose, Lactose, Galactose.
- Ủ nhiệt độ phòng trong 2 ngày.
- Đồng hoá loại đường nào, nấm sẽ mọc quanh đĩa đường đó.

3.2.4. Thử nghiệm đồng hoá Nitrate
- Quy trình cũng giống như đồng hoá đường. Chỉ khác là môi trường đông thì đặt lên mặt thạch đĩa KNO3.
Bảng tóm tắt các đặc điểm để định danh một số loại Candida sp thường gặp.

4. Ý NGHĨA VIỆC TÌM THẤY CANDIDA TRONG BỆNH PHẨM
- Nếu bệnh phẩm có tính tạp nhiễm như niêm mạc miệng, dịch âm đạo, đờm, phân: chỉ có ý nghĩa khi khảo sát trực tiếp thấy nhiều sợi tơ nấm giả và tế bào nấm men. Đối với những loại bệnhphẩm này khảo sát trực tiếp quan trọng hơn cấy.
- Nếu bệnh phẩm là máu, dịch não tuỷ, tuỷ xương, mủ ổ apxe...khảo sát trực tiếp hay cấy tìm thấy Candida đều có ý nghĩa chẩn đoán.

RE: [TH] Chẩn đoán vi nấm Candida - phamquyetchien_xn - 03-13-2013

khảo sát lam thấy bào tử xếp trùm như trùm nho ko ak