+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Hóa sinh - Miễn dịch (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-11.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-100.html)
+---- Chủ đề: Quy trình định lượng Immunoglobulin A (IgA) (/thread-870.html)
Quy trình định lượng Immunoglobulin A (IgA) - tuyenlab - 11-21-2012
QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG IMMUNOGLOBULIN A (IgA)
1. Tổng quan:
Globulin miễn dịch trong huyết thanh người gồm 5 lớp: IgA, IgG, IgM, IgD và IgE. IgA gồm 2 hệ thống là IgA trong huyết thanh (IgA1) và IgA tiết tại chỗ (IgA2). IgA không qua được hàng rào rau thai. Đến nay vài trò của IgA vẫn chưa được biết rõ. IgA tiết cấu tạo gồm chuỗi J và phần còn lại đóng vai trò bảo vệ phân tử khỏi các emzym phân hủy protein. IgA tiết là kháng thể chiếm ưu thế trong các dịch tiết: nước bọt, nước mắt, sữa non, dịch mũi họng, phế quản - phổi, dịch dạ dày- ruột…
Nó có vai trò liên kết các vi sinh vật xâm nhập vào màng nhày từ đó tạo điều kiện cho đại thực bào dễ dàng bắt giữ và khởi động phản ứng viêm. Vì vậy IgA đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ cơ quan hô hấp, tiết niệu- sinh dục, tiêu hóa chống lại nhiễm ký sinh trùng.
2. Nguyên tắc:
Định lượng IgA trong mau của bệnh nhân được xác định theo phương pháp miễn dịch đo độ đục.
3. Chuẩn bị:
3.1. Dụng cụ:
- Máy phân tích AU400, AU640…
3.2. Hóa chất:
- Hóa chất của hãng Olympus: Bảo quản tránh ánh sáng, ổn định 90 ngày sau khi mở nắp và bảo quản trên máy.
- Dung dịch chuẩn: Multi protein calibrator.
- Huyết thanh kiểm tra chất lượng của Olympus.
3.3. Bệnh phẩm:
- Huyết thanh, huyết tương chống đông bằng Heparin, EDTA
- Tránh sử dụng bệnh phẩm có độ đục cao.
- Ổn định trong 8 tháng ở 2- 25ºC.
4. Calibration:
Được tiến hành hàng tháng hoặc khi thay lô hóa chất mới bằng dung dịch Multi protein calibration của hãng Olympus.
5. Kiểm tra chất lượng:
5.1. Mẫu huyết thanh kiểm tra IgA được tiến hành hàng tuần và khi có nghi ngờ, trên 2 mức (mức có giá trị bình thường và mức có giá trị bệnh lý).
5.2. Xử lý: kết quả kiểm tra chất lượng không vi phạm các luật của quy trình kiểm tra chất lượng thì mới tiến hành phân tịch cho bệnh nhân.
6. Tiến hành:
Bệnh phẩm được quay ly tâm tách huyết thanh (huyết tương) và phân tích tự động trên máy Olympus AU400, AU640.
7. Kết quả và biện luận:
Giá trị tham chiếu: 70-400 mg/dL
7.1. IgA máu tăng:
- Nhiễm trùng: đường hô hấp, đường tiêu hóa…
- Đa u tủy ương tuýp IgA.
7.2. IgA máu giảm trong:
- Bệnh tự miễn.
- Dị ứng.
8. Các yếu tố ảnh hưởng:
- Nồng độ bilirubin trên 640 µmol/l gây nhiễu dưới 10% kết quả.
- Nồng độ lipid huyết thanh trên 600 mg/dl gây nhiễu dưới 10% kết quả.
- Nồng dộ haemoglobin 5g/l gây nhiễu dưới 3% kết quả.