+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Vi sinh Y học (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-71.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-98.html)
+---- Chủ đề: Ureaplasma urealyticum nuôi cấy, định danh và kháng thuốc (/thread-5730.html)
Ureaplasma urealyticum nuôi cấy, định danh và kháng thuốc - tuyenlab - 01-26-2016
Ureaplasma urealyticum nuôi cấy, định danh và kháng thuốc
I. MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ
1. Mục đích
Phát hiện và định danh U. urealyticum bằng phương pháp nuôi cấy. Xác định mức độ nhạy cảm với kháng sinh của U. urealyticum.
2. Nguyên lý
Vi khuẩn được định danh dựa vào đặc điểm nuôi cấy, một số tính chất chuyển hóa.
Mức độ nhạy cảm với kháng sinh của U. urealyticum được xác định bằng phương pháp cấy trong canh thang đã có sẵn lượng kháng sinh nhất định. Đánh giá mức độ nhạy cảm với kháng sinh tùy theo khả năng mọc của vi khuẩn trong môi trường có chứa kháng sinh.
II. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện
- Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.
- Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.
2. Phương tiện, hóa chất
Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.
2.1. Trang thiết bị
- Tủ ấm CO2
- Tủ an toàn sinh học cấp 2
- Bàn phụ khoa
- Đèn phụ khoa
- Kính hiển vi quang học
2.2. Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)
Que lấy bệnh phẩm hoặc tăm bông vô trùng
Mỏ vịt (to, vừa và nhỏ)
Môi trường A7
Môi trường DUO KIT
Bông
Cồn 90 độ (vệ sinh dụng cụ)
Đèn cồn
Panh
Khay đựng bệnh phẩm
Hộp vận chuyển bệnh phẩm
Mũ
Khẩu trang
Găng tay
Găng tay xử lý dụng cụ
Quần áo bảo hộ
Hộp đựng dung dịch khử khuẩn ngâm mỏ vịt
Bút viết kính
Bút bi
Bật lửa
Sổ lưu kết quả xét nghiệm
Cồn sát trùng tay nhanh
Dung dịch nước rửa tay
Khăn lau tay
Giấy trả kết quả xét nghiệm
QC (nếu thực hiện) *
EQAS (nếu thực hiện) *
* Ghi chú:
- Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng ≥ 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).
- Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).
3. Bệnh phẩm
Dịch, mủ: dịch cổ tử cung, niệu đạo…
4. Phiếu xét nghiệm
Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu.
III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.
1. Lấy bệnh phẩm
Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh
2. Tiến hành kỹ thuật
2.1. Ngâm tăm bông bệnh phẩm trong dung dịch trộn bệnh phẩm.
2.2. Nhỏ 200ul dung dịch pha loãng vào các giếng U, D, H.
2.3. Nhỏ 100ul dung dịch trộn bệnh phẩm vào các giếng U, X, H, D.
2.4. Trộn đều trong giếng D, hút 25ul sang các giếng U và H.
2.5. Dán khay thử và để vào tủ ấm với nhiệt độ 370C.
IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
4.1. Kết quả định danh
Có sự đổi màu ở giếng U (hồng tím): Nuôi cấy dương tính
Không có sự đổi màu: Âm tính
4.2. Kết quả kháng sinh đồ
Có sự đổi màu ở cả 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh: R
Có sự đổi màu ở cả 1 trong 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh: I
Không có sự đổi màu ở cả 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh: S
V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
- Nồng độ tủ ấm CO2 không đủ tiêu chuẩn.
- Nhỏ dung dịch không chính xác.
Theo quyết định số 26 /QĐ-BYT ngày 03 tháng 01 năm 2013