+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Hóa sinh - Miễn dịch (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-11.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-100.html)
+---- Chủ đề: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh (/thread-372.html)
[TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - tuyenlab - 04-06-2012
Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh
1. Vài nét đại cương về cholesterol toàn phần:
Cholesterol là một alcol vòng 27 C có nhóm – OH ở vị trí C 3. Khi alcol kết hợp với acid béo ta được acid béo có tên là cholesterid. Trong cơ thề chlesterol tồn tại ở hai dạng cholesterol tự do và dạng cholesterol đã este hoá. Cholesterol toàn phần bao gồm cả 2 dạng này. Cholesteol trong cơ thể được sinh ra từ 2 nguồn là nội sinh và ngoại sinh. Nội sinh là cơ thể tự tổng hợp lên từ nguyên liệu là acetylCoA. Cơ quan tổng hợp chủ yếu là gan, thận, tinh hoàn, buồng trứng. Mỗi ngày cơ thể tự tổng hợp được khoảng 1g cholesterol...Cholesterol ngoại sinh là cholesterol được đưa từ bên ngoài vào qua thức ăn.. Thức ăn chứa nhiều cholesterol là lòng đỏ trứng gà, phủ tạng động vật... Tổng lượng thức ăn đưa vào trung bình trong ngày khoảng 300 – 500 mg cholesterol. Con đường đào thải cholesterol chủ yếu thông qua việc bài xuất mật của gan. Trong cơ thể cholesterol có vai trò rất quan trọng vì nó tham gia cấu tạo nên màng tế bào, là nguyên liệu tổng hợp nên các hormon có bản chất steroid, và là một trong ba thành phần của dịch mật Tuy nhiên nồng độ cholesterol tăng cao trong máu lại là nguyên nhân dẫn đến vữa xơ động mạch.
2. Nguyên tắc kỹ thuật:
Cholesterol toàn phần trong huyết thanh gồm cholesterol tự do và cholesterol este hoá.
Để định lượng cholesterol toàn phần, trước hết phải dùng phản ứng thuỷ phân cắt đứt liên kết este, biến cholesterol este thành cholesterol tự do.
Cholestrol esterase
Cholesterol este + H[sub]2[/sub]O ------------------------> cholesterol tự do + AX béo
cholesterol oxydase
Cholesterol tự do + O[sub]2[/sub] ----------------------------> Cholesten - 4 + H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]
POD
H[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub] + 4 Aminoantipyrin + phenol ------------------> Quinonemin + 4 H[sub]2[/sub]O
(Phức hợp màu hồng cánh sen)
Đậm độ màu của phức hồng cánh sen tỷ lệ thuận với nồng độ cholesterol toàn phần trong huyết thanh và được xác định ở bước sóng 546nm bằng phép đo điểm cuối.
3. Chuẩn bị
- Dụng cụ: bộ đồ lấy máu tĩnh mạch, ống nghiệm, giá ống nghiệm, pipet tự động, đầu côn, bút ghi kính, máy ly tâm, máy sinh hóa bán tự động.
- Thuốc thử: bộ kit hóa chất mua sẵn gồm: reagent A- cholesterol và standard - cholesterol (cholesterol mẫu có nồng độ 5,18mmol/L).
4. Tiến hành
- Lấy máu tĩnh mạch, ly tâm để lấy huyết thanh.
- Hút 500µL reagent A- cholesterol lần lượt vào 3 ống trắng (Tr), mẫu (M), thử (T)
- Hút 5µL dung dịch cholesterol mẫu vào ống mẫu
- Hút 5 µL huyết thanh hoặc huyết tương vào ống thử
- Lắc đều, để 10 phút ở nhiệt độ phòng hoặc 5 phút ở 37[sup]o[/sup]C .
- Đo máy ở bước súng 505nm, phương phỏp đo điểm cuối
- Tác phong: vụ khuẩn, sạch gọn, đúng kỹ thuật, đúng thời gian (40- 45phút )
5. Nhận định kết quả.
Bình thường nồng độ cholesterol toàn phần trong huyết thanh là 3,9 - 5,2 mmol/l.
Khi nồng độ cholesterol > 5,3 mmol/l được gọi là tăng. Cholesterol máu tăng gặp trong các trường hợp sau:
-Tăng cholesterol thứ phát: trong các bệnh đái đường, thiẻu năng tuyến giáp, bệnh goute, viêm tuỵ cấp và mạn, thận hư nhiễm mỡ.
-Tăng cholesterol nguyên phát trong các bệnh : bệnh bẩm sinh, tăng lipoprotein với huyết thanh trong, tăng lipid máu gia đình...
Cholesterol máu giảm hiếm gặp, trong trường hợp cholesterol toàn phần thấp < 2,0 mmol/l là dấu hiệu của suy giảm chuyển hoá tế bào gan.
Lưu ý: Lượng hút phụ thuộc vào hóa chất bạn đang dùng (ở đây chỉ mang tính tham khảo)
RE: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - hoaithuong1992 - 10-12-2013
cre là dùng phép đo nào thưa thầy???
e có thể nhìn vào bước sóng để biết là phép đo gì không thầy
RE: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - hoaithuong1992 - 10-12-2013
tăng nguyên phát là gì ạ? thứ phát là gì ạ?
RE: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - phuhmtu - 10-13-2013
Nguyên phát là bản thân nó đã tăng không phụ thuộc vào bệnh khác, còn thứ phát là hệ quả của bệnh khác gây ra
RE: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - huynhthitrangchau - 10-11-2018
cho mình hỏi có thể dùng ống nắp xám làm xét nghiệm choles ko ạ
RE: [TH] Định lượng Cholesterol toàn phần trong huyết thanh - tuyenlab - 10-16-2018
(10-11-2018, 01:31 AM)huynhthitrangchau Đã viết: cho mình hỏi có thể dùng ống nắp xám làm xét nghiệm choles ko ạ
Ống xám sử dụng chất chống đông là NaF, do vậy có thể sử dụng để làm XN Choles được. Ống này cso thể làm được hầu hết các XN hóa sinh trừ 1 số XN như: Sắt, Caxi, Điện giải đồ, ALP