+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-8.html)
+--- Diễn đàn: Huyết học - Truyền máu (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-70.html)
+---- Diễn đàn: Thực hành (https://xetnghiemdakhoa.com/diendan/forum-102.html)
+---- Chủ đề: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu (/thread-121.html)
[TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tuyenlab - 02-21-2012
ĐẾM SỐ LƯỢNG BẠCH CẦU
(Bằng kính hiển vi quang học)
1. Nguyên tắc:
Đếm số lượng bạch cầu của máu toàn phần trong một thể tích đã biết với một tỷ lệ pha loãng nhất định để tính ra số lượng bạch cầu trong một lít máu toàn phần.
2. Máu xét nghiệm, hoá chất và dụng cụ:
- Máu tĩnh mạch hoặc mao mạch chưa kịp đông hay đã được chống đông bằng EDTA khô 1,5mg/ml.
- Dụng cụ lấy máu mao mạch (đầu ngón tay) và tĩnh mạch.
- Dung dịch đếm bạch cầu: có thể dùng dung dịch Lazarus, dung dịch Hayem hoặc dung dịch xanh acetic.
- Quả bóp cao su.
- Ống pha loãng (potain) bạch cầu, loại pha loãng 20 lần .
- Buồng đếm, lamen.
- Kính hiển vi quang học.
3. Kỹ thuật:
3.1. Pha loãng, nhỏ lên buồng đếm:
Lắc kỹ ống máu, nếu chích đầu ngón tay thì nhớ thấm bỏ giọt đầu. Dùng potain hút máu đến vạch 0,5. Lau sạch đầu ống hút, chú ý không để máu trong ống hút bị thiếu do động tác này. Sau đó hút tiếp dung dịch pha loãng bạch cầu đến vạch 11 ở phía trên bầu (độ pha loãng 1/20), bỏ quả bóp ra, dùng ngón tay cái và trỏ (hoặc giữa) bịt chặt hai đầu potain, lắc theo chiều dọc potain khoảng 2-3 phút đến khi màu của máu trong potain chuyển sang màu sẫm. Chú ý không để có bọt khi hút máu và dung dịch pha loãng, không hút máu quá vạch chuẩn, không được để mất máu khi hút dung dịch pha loãng.
Gắn lamen lên buồng đếm khô, sạch. Sau khi lắc kỹ, bỏ giọt đầu, để đầu dưới potain sát cạnh lamen, nhỏ một giọt to đầy buồng đếm nhưng không tràn ra ngoài, đợi 5 phút. Dùng vật kính x10 kiểm tra xem bạch cầu có trải đều trên buồng đếm hay không.
3.2. Đếm số lượng bạch cầu và tính kết quả:
3.2.1. Buồng đếm Goriaep:
Đếm bạch cầu trong 25 khu vực (mỗi khu vực có 4 ô vuông). Gọi n là tổng số bạch cầu đếm được trong 25 khu vực, độ pha loãng 1/20 thì :
Số lượng bạch cầu = n x 20 x 10/4 = 50 n / mm^3
Trong đó:
- 10 là chiều cao buồng đếm.
- 4 là 4 mm ^2 (diện tích của 25 khu vực đếm).
3.2.2. Buồng đếm Neubauer và Smic:
Đếm bạch cầu trong 4 khu vực (mỗi khu vực có 16 ô vuông). Gọi n là tổng số bạch cầu đếm được trong 4 khu vực, độ pha loãng 1/20 thì :
Số lượng bạch cầu = n x 20 x 10 / 4 x 10^6 = 50 n x 10^6/lit
Trong đó:
- 10 là chiều cao buồng đếm.
- 4 là 4 mm [sup]2 [/sup] (diện tích của 4 khu vực đếm).
3.2.3. Buồng đếm Thoma:
Đếm bạch cầu trong 16 khu vực (mỗi khu vực có 16 ô vuông) có diện tích là 1 mm^2. Gọi n là tổng số bạch cầu đếm được trong 16 khu vực, độ pha loãng 1/20 thì :
Số lượng bạch cầu = n x 20 x 10 x 10^6= 200n x 10^6/ lit
3.2.4. Buồng đếm Malassez:
Đếm bạch cầu trong 100 khu vực (mỗi khu vực có 20 ô vuông) có diện tích là 1mm^2. Gọi n là tổng số bạch cầu đếm được trong 100 khu vực, độ pha loãng 1/20 thì :
Số lượng bạch cầu = n x 20 x 10 x 10^6 = 200n x 10^6/lit
4. Nguyên nhân sai số:
- Máu xét nghiệm không đúng qui cách: đông dây, máu mao mạch bị pha loãng bởi dịch gian bào do nặn bóp đầu ngón tay nhiều khi chích máu, ống máu để lâu không đậy nút,...
- Dụng cụ không đủ tiêu chuẩn: bẩn, ướt, ...
- Gắn lamen không khít.
- Pha loãng không chuẩn: hút máu không đúng vạch qui định trên potain, dung dịch pha loãng thiếu hoặc thừa.
- Dung dịch pha loãng nhiều cặn hoặc vẩn đục.
- Không trộn đều.
- Nhỏ trên buồng đếm không đúng kỹ thuật: có bọt khí, bạch cầu phân bố không đều,...
- Đếm hoặc tính kết quả sai.
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - huyquannguyen - 07-26-2013
Thưa thầy .thầy xem lại giúp em phần tính số lượng bạch cầu trong 1lit máu ạ.sao lại = 200n x 10^9 đối với thoma và 50n x 10^9 với smic or neubauer ạ.theo em chỉ nhân với 10^6 thôi chứ ạ.
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tuyenlab - 07-26-2013
(07-26-2013, 03:12 PM)huyquannguyen Đã viết: Thưa thầy .thầy xem lại giúp em phần tính số lượng bạch cầu trong 1lit máu ạ.sao lại = 200n x 10^9 đối với thoma và 50n x 10^9 với smic or neubauer ạ.theo em chỉ nhân với 10^6 thôi chứ ạ.
Ok, mình đã sửa, chắc lúc đánh không để ý. Cảm ơn nhé!
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - taphuong - 11-13-2013
thưa thây.thầy có thể giúp e cách phân biệt đâu là bạch cầu không ạ.trong buồng đếm có nhiều cái chỉ cần xoay vi cấp là nó lại hiện ,có vành sáng thì có phải bạch cầu không ạ.lam sao để đếm đúng được.
Presentation1.pptx (Kích thước: 73.39 KB / Tải về: 440)
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - vnthangpro - 06-07-2015
Chào Admin.
Cho mình hỏi chút nhé. Trong xét nghiệm phát hiện vi khuẩn Lao, có nói đến khái niệm số vi khuẩn Lao có trong đơn vị vi trường, ví dụ "Có từ 10-99 AFB trên 100 vi trường" vậy trong câu này "VI TRƯỜNG" được hiểu như thế nào ạ?
Mình xin cảm ơn.
p/s: mình không phải chuyên về xét nghiệm, mình học bên Sinh học, nên một số định nghĩa không hiểu lắm.
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tuyenlab - 06-07-2015
(06-07-2015, 05:20 PM)vnthangpro Đã viết: Chào Admin.
Cho mình hỏi chút nhé. Trong xét nghiệm phát hiện vi khuẩn Lao, có nói đến khái niệm số vi khuẩn Lao có trong đơn vị vi trường, ví dụ "Có từ 10-99 AFB trên 100 vi trường" vậy trong câu này "VI TRƯỜNG" được hiểu như thế nào ạ?
Mình xin cảm ơn.
p/s: mình không phải chuyên về xét nghiệm, mình học bên Sinh học, nên một số định nghĩa không hiểu lắm.
Khi bạn nhìn vào kính hiển vi, toàn bộ vùng tròn mà bạn nhìn được là 1 vi trường. Hiểu một cách đơn giản khi bạn nhìn xuống giếng thì toàn bộ mặt nước trong giếng đó là 1 vi trường. Khi bạn sang giếng khác là vi trường khác.
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tồ thị diễm - 09-21-2015
nếu như buồng đếm hoặc pipet bị bẩn thì làm sao phân biệt bạch cầu và các cặn, bụi, tạp chất có hình dáng tương tự
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tuyenlab - 09-22-2015
(09-21-2015, 12:37 PM)tồ thị diễm Đã viết: nếu như buồng đếm hoặc pipet bị bẩn thì làm sao phân biệt bạch cầu và các cặn, bụi, tạp chất có hình dáng tương tự
Bạch cầu có nhân bạn nhé. Vì thế khi xoay vi cấp ta sẽ thấy 1 viền bao ngoài, bên trong có nhân chia đoạn hoặc nhân tròn.
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - VoThiYen - 10-05-2016
thầy ơi..e nhìn thấy được nhưng đếm bạch cầu vẫn sai..ktra ở trường thì chỉ nhìn ở vật kính 10 nên e không biết làm sao để xác định đúng cái nào là bạch cầu..e hỏi thì bạch cầu là la nhưng hình tròn nhỏ có chấm đen phải ko ạ
RE: [TH] Đếm số lượng Bạch cầu - tuyenlab - 10-07-2016
(10-05-2016, 05:25 PM)VoThiYen Đã viết: thầy ơi..e nhìn thấy được nhưng đếm bạch cầu vẫn sai..ktra ở trường thì chỉ nhìn ở vật kính 10 nên e không biết làm sao để xác định đúng cái nào là bạch cầu..e hỏi thì bạch cầu là la nhưng hình tròn nhỏ có chấm đen phải ko ạ
Đúng rồi em, là những hình nhỏ chấm đen ở giữa, xung quanh hơi sáng một chút.