Tìm kiếm mọi thứ bạn cần tại đây
  • 18 Vote(s) - Trung bình 2.78
  • 5
  • 4
  • 3
  • 2
  • 1
Chế độ chủ đề

[SOPs] Định lượng IgA Lambda
#1
ĐỊNH LƯỢNG IgA LAMBDA

I. NGUYÊN LÝ
Dựa  trên  nguyên  lý  đo  độ  đục  miễn  dịch  do  sự  kết  hợp  giữa  kháng nguyên hoà tan (IgA Lambda) và kháng thể đặc hiệu với IgA Lambda. Khi phản ứng kết hợp miễn dịch xảy ra sẽ tạo ra phức hợp miễn dịch có độ đục đo được bằng quang học qua cuvette đo với nguốn sáng của thiết bị.
Với việc đo độ đục các chất chuẩn (Calibrator) biết trước nồng độ, thiết bị đo sẽ thiết lập được đường cong chuẩn để dựa vào đường cong chuẩn nay khi đo độ đục của mẫu thử IgA Lambda chưa biết nồng độ trong huyết thanh của  người bệnh  thì sẽ tính được nồng độ của IgA  Lambda  trong mẫu huyết thanh của người bệnh này.

II. CHỈ ĐỊNH
Theo dõi điều trị bệnh lý đa u tuỷ xương (multiple myeloma).

III. CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Không có chống chỉ định.

IV. CHUẨN BỊ
1. Người thực hiện
01 Cán bộ đại học chuyên ngành Hóa sinh và một KTV.

2. Phương tiện, hóa chất
2.1. Phương tiện
Máy xét nghiệm miễn dịch độ đục SPAPLUS hãng Binding Site (Anh)
- Máy ly tâm;
- Tủ lạnh để bảo quản hóa chất, chất hiệu chuẩn, QC, mẫu bệnh phẩm;
- Pipet các loại, ống sample cup, sample tuýp;
- Ống nghiệm, đầu côn xanh và vàng;
- Giá đựng ống nghiệm.

2.2. Hoá chất
Kít hoá chất đầy đủ gồm :
+ Antiserum:  Human IgA  Lambda  đủ cho 50 test. Chứa kháng thể đa dòng đơn đặc hiệu chiết xuất từ cừu và chất bảo quản: 0.099% sodium azide, 0.1%  E-amino-n-caproic  acid  (EACA),  0.01%  benzamidine  và  1mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA).
+ Dung dịch đệm (Reaction buffer) cho phản ứng đủ cho 50 test. Chứa chất bảo quản có thành phần 0.099% sodium azide.
+ Chất hiệu chuẩn: 6 mức nồng độ từ hấp đến cao (6x1,0 mL/lọ). Chứa huyết  thanh  hỗn  hợp  của  người  bình  thường  và  chất  bảo  quản:  0.099% sodium azide, 0.1% EACA, 0.01% benzamidine..
+ QC: 2 mức nồng độ  (thấp & cao), (2x1.0 mL/lọ). Chứa huyết thanh hỗn hợp của người và chất bảo quản: 0.099% sodium azide, 0.1% EACA, 0.01% benzamidine.
- Hóa chất được ổn định đến ngày ghi trên nắp hộp với điều kiện không mở nắp và bảo quản ở nhiệt độ 2-8oC. Không được để  hóa chất  trong ngăn đá  tủ lạnh. Antiserum, đệm, Chất  hiệu  chuẩn và QC có thể để 3 tháng sau khi mở nắp trong tủ lạnh ở nhiệt độ 2-8oC hay 28 ngày  trên máy SPAPLUSvới điều kiện duy trì chạy máy liên tục.

2.3. Các dụng cụ tiêu hao khác
- Găng tay, khẩu trang, nước rửa tay, khăn lau tay.
- Bông, cồn sát trùng, bơm kim tiêm lấy máu.

3. Người bệnh
-  Cần giải thích cho người bệnh  và người nhà  người bệnh  về mục đích của xét nghiệm.
-  Người bệnh  cần phối hợp để lấy máu theo đúng yêu cầu về thời gian và số lượng.

4. Phiếu xét nghiệm
Thực hiện theo y lệnh của bác sỹ lâm sàng trên phiếu xét nghiệm.

V. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
1. Lấy bệnh phẩm
-  Thực hiện trên mẫu máu: Dùng huyết thanh (không dùng chất chống đông).
-  Tính ổn định của mẫu: Mẫu ổn định 16h ở nhiệt độ phòng, 21 ngày ở nhiệt độ 2-8ºC. Để bảo quản lâu hơn, mẫu có thể được đông lạnh trong 3 tháng ở nhiệt độ  -20ºC hoặc thấp hơn nữa. Mẫu huyết thanh chỉ được làm đông một lần.

2. Tiến hành kỹ thuật
2.1. Chuẩn bị máy phân tích
-  Dựng  đường  chuẩn:  dựa  trên  chuẩn  6  điểm  với  các  nồng  độ  chuẩn khác nhau. Dựng lại đường cong chuẩn sau 40 ngày. Ngoài ra, cần phải hiệu chuẩn lại trong các trường hợp sau: thay đổi số  lot hoá chất, thay thế  các bộ phận của máy, QC hàng ngày bị ngoài khoảng tham chiếu.
-  Phân tích QC:  ở  cả  2 nồng độ. Khi QC đạt mới tiến hành phân tích mẫu.

2.2. Phân tích mẫu
- Mẫu bệnh phẩm nên được tiến hành phân tích trong vòng 2 giờ.
-  Đánh  số  (hoặc  ID  của  người  bệnh);  chọn  test  và  vận  hành  theo protocol máy sẽ tự động phân tích.

2.3.  Dải đo được  : 0.16  -10.4g/L. Khi vượt ngưỡng đo trên phải tiến hành pha loãng bệnh phẩm.

VI. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Người bình thường có IgA Kappa trong dải 0.57-2.08 g/L, IgA Lambda trong dải : 0.44-2.04 g/L vả tỷ lệ IgA Kappa/ IgA Lambda từ 0.78-1.94.

VII. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
- Các yếu tố có thể ảnh hưởng đến kết quả khi:Mẫu máu bị  huyết tán, mỡ  máu  cao, huyết thanh đục  ở  mức nhìn thấy được.
- Xử trí:
Khi lấy máu tránh gây vỡ  hồng cầu, mẫu bị  vỡ  hồng cầu nên lấy mẫu máu khác thay thế. Khi huyết thanh đục phải ly tâm trước khi tiến hành xét nghiệm.

Nguồn: Quyết định 3336/QĐ-BYT 






Thành viên đang xem chủ đề: 1 Khách

Color Skins

Change Color:

Background Patterns:

Background Images:

Background Header:

Setting Panel

Main Options: