Diễn đàn xét nghiệm đa khoa
Phản ứng hòa hợp đầy đủ - Phiên bản có thể in

+- Diễn đàn xét nghiệm đa khoa (http://xetnghiemdakhoa.com/diendan)
+-- Diễn đàn: ...:::THẢO LUẬN CHUYÊN NGÀNH:::... (/forumdisplay.php?fid=8)
+--- Diễn đàn: Huyết học - Truyền máu (/forumdisplay.php?fid=70)
+---- Diễn đàn: Thực hành (/forumdisplay.php?fid=102)
+---- Chủ đề: Phản ứng hòa hợp đầy đủ (/showthread.php?tid=161)

Pages: 1 2


Phản ứng hòa hợp đầy đủ - tuyenlab - 02-22-2012 04:43 PM

PHẢN ỨNG HOÀ HỢP ĐẦY ĐỦ
Tiến sỹ. Bùi Thị Mai An
1. Đặt vấn đề
Hiện nay, trên thế giới để bảo đảm an toàn truyền máu về mặt miễn dịch, mọi phòng xét nghiệm phát máu đều định nhóm máu hệ ABO, hệ Rh và các hệ nhóm máu hồng cầu khác, xác định kháng thể bất thường cho cả người cho và bệnh nhân. Sau đó chọn túi máu có các nhóm máu phù hợp nhất với bệnh nhân để tiến hành phản ứng hoà hợp cho bệnh nhân. Do vậy truyền máu tại các nước tiên tiến là rất an toàn và hiệu lực. Tại Việt Nam hiện nay việc đảm bảo an toàn truyền máu về mặt miễn dịch chúng ta mới chỉ được thực hiện định nhóm máu hệ ABO và làm phản ứng chéo ở 220C. Do vậy an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại nước ta chưa được đảm bảo. Trong giai đoạn còn nhiều khó khăn về mặt kinh tế chưa đủ điều kiện mua kháng huyết thanh mẫu của hệ hồng cầu để định nhóm cho cả người cho và bệnh nhân thì việc thực hiện phản ứng hoà hợp đầy đủ (Tiến hành phản ứng hoà hợp ở cả 220C, 37 0C, enzyme và nghiệm pháp Coombs gián tiếp) là rất cần thiết để bảo đảm an toàn truyền máu về mặt miễn dịch. Kỹ thuật này là một kỹ thuật đơn giản, dễ thực hiện và chỉ cần đầu tư thêm một số thuốc thử mà hiện tại các địa phương chưa có đủ.
2. Mục đích của kỹ thuật
Phản ứng hoà hợp đầy đủ là phản ứng để lựa chọn nhóm máu hệ hồng cầu của người cho phù hợp nhất với bệnh nhân, đặc biệt là những trường hợp bệnh nhân có kháng thể bất thường. Xét nghiệm này góp phần đảm bảo an toàn về mặt miễn dịch cho bệnh nhân khi được truyền máu, thực hiện truyền máu có hiệu lực.
3. Mục tiêu học tập:
Khi bạn học xong kỹ thuật này bạn phải có khả năng:
1. Thực hiện một cách chính xác phản ứng hoà hợp đầy đủ.
2. Xác định và tránh những lầm lẫn trong việc thực hiện phản ứng hoà hợp.
3. Xác định được các dụng cụ thiết để tiến hành phản ứng hoà hợp.
4. Nguyên lý của phản ứng: Là phản ứng ngưng kết, để tìm sự hoà hợp về nhóm máu hệ hồng cầu ABO và các hệ nhóm máu hồng cầu khác giữa người cho và người nhận.
5. Dụng cụ và thuốc thử:

A. Dụng cụ:

1. Ly tâm ống thẳng.
2. Tủ lạnh bảo quản thuốc thử huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu và mẫu máu, huyết thanh Coombs.
3. Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết thanh
4. Hộp sáng hoặc gạch men trắng.
5. Bình cách thuỷ 370C (hoặc tủ ấm hoặc bình giữ nhiệt)
6. Bình đựng nước muối.
7. Nhiệt kế
8. Pipet Pasteur.
9. Ống nghiệm để định nhóm (50 x 7 mm) nhựa hoặc thuỷ tinh.
10. Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật.
11. Lam kính.
12. Bút chì kính, bút dạ
13. Giấy đo pH
14. Bông thấm
15. Cốc mỏ thuỷ tinh
16. Que thuỷ tinh
17. Kính hiển vi
18. Tủ sấy dụng cụ
B. Thuốc thử:
- Anti D
- Huyết thanh Coombs
- Nước muối 9 %
- Nước cất hoặc nước không có ion.
6. Tiến hành kỹ thuật:
6.1. Chuẩn bị
1. Rửa hồng cầu hồng cầu nhóm O và của người cho 3 lần bằng nước muối 0,9% và pha thành dung dịch hồng cầu 5% để tiến hành phản ứng.
2. Ly tâm mẫu máu của bệnh nhân để tách huyết thanh.
3. Chuẩn bị hồng cầu chứng gắn IgG cho nghiệm pháp kháng globulin
- Rửa hồng cầu hồng cầu nhóm O 3 lần bằng nước muối 0,9% và pha thành dung dịch hồng cầu 5%.
- Nhỏ vào 1 ống nghiêm: 1 thể tích hồng cầu 5% và 2 thể tích anti D (IgG).
- Trộn đều, ủ 30 phút ở 37°C.
- Sau khi ủ, lấy ra rửa 3 lần bằng nước muối 0,9%
- Treo tế bào đã được cảm nhiễm trong nước muối để có dung dịch hồng cầu 5%.
- Lấy một thể tích dịch treo hồng cầu 5% đã được cảm nhiễm, thêm 2 thể tích kháng glubolin, trộn đều và ly tâm ống nghiệm. Phản ứng phải dương tính 3+. Nếu phản ứng này quá mạnh hoặc quá yếu sẽ không tốt cho việc làm chứng cho nghiệm pháp kháng globulin.
- Những tế bào đã được cảm nhiễm này có thể được bảo quản ở 4°C trong vòng 48 giờ.
6.2. Tiến hành phản ứng hoà hợp đầy đủ:
Bư­ớc 1: Nhỏ 3 giọt huyết thanh bệnh nhân
Bư­ớc 2: Thêm 1 giọt hồng cầu của ngư­ời cho 5%

B­ước 3: Trộn đều

Bước 4: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây

B­ước 5: Đọc và ghi lại kết quả

Bư­ớc 6: Ủ tiếp ở 37˚C/ 30 phút

Bư­ớc 7: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây

B­ước 8: Đọc, ghi kết quả
B­ước 9: Rửa HC 3 lần bằng n­ước muối 0,9%

B­ước 10: Thêm 2 giọt kháng globulin.

B­ước 11: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây

B­ước 12: Đọc và ghi kết quả

Bư­ớc 13: Nếu kết quả âm tính thêm 1 giọt hồng cầu chứng
Bư­ớc 14: Ly tâm 1000 v/ph/15 -30 giây
B­ước 15: Đọc, ghi lại kết quả

o Kết quả phải d­ương tính
o Nếu kết quả âm tính phải làm lại thử nghiệm
6. 3. Nhận định kết quả:
- Nếu kết quả một trong những điều kiện, nhiệt độ của phản ứng hoà hợp đầy đủ trên dương tính (Ngưng kết) phải tiến hành chọn máu cho bệnh nhân.
- Nếu kết quả phản ứng hoà hợp đầy đủ ở các điều kiện, nhiệt độ trên đều âm tính (Không ngưng kết), máu người cho hoà hợp với máu của bệnh nhân. Túi máu được phát để truyền cho bệnh nhân.


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - kimvanthach - 08-14-2012 11:02 PM

phản ứng hòa hợp mình thấy trước kia sách có nói là phải làm ở 4 điều kiện mà
cậu có tài liệu nào chi tiết về làm 4 điều kiện không share cho mình với.thanks


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - zinjinkan93 - 05-06-2013 03:33 PM

tai sao khong ap dung coob gian tiep de thu laj khj ket qua khong ngung ket.


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - iloveyouquang - 05-06-2013 04:46 PM

chưa thấy quy trinh nào viết lại có đến 15 bước cả, nhiều thế nhớ hết sao đc, sao ko tóm tắt nhiều nhất 5 bước thôi chứ nhỉ?


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - tuyenlab - 05-06-2013 09:15 PM

(05-06-2013 03:33 PM)zinjinkan93 Đã viết: Bạn không thể xem link này. Hãy đăng ký thành viên bằng cách bấm vào đây để có thể xem link này.tai sao khong ap dung coob gian tiep de thu laj khj ket qua khong ngung ket.

Bạn đọc kỹ lại nhé. Trong đó có sử dụng ht coombs rồi mà.
Ps: lần sau chú ý gõ tiếng Việt đầy đủ.

(05-06-2013 04:46 PM)iloveyouquang Đã viết: Bạn không thể xem link này. Hãy đăng ký thành viên bằng cách bấm vào đây để có thể xem link này.chưa thấy quy trinh nào viết lại có đến 15 bước cả, nhiều thế nhớ hết sao đc, sao ko tóm tắt nhiều nhất 5 bước thôi chứ nhỉ?

Thế mới gọi là đầy đủ. Bạn có thể thu gon lại. Nhưng chỉ là khác tên thôi chứ vẫn phải làm đầy đủ các bước mà.


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - nguyenhang.xn4a - 06-17-2013 10:58 AM

thầy cho e hỏi:trong qui trình làm coombs gián tiếp dùng HCO Rh+ để cho kháng thể thiếu cảm nhiễm nó rồi xác định như coombs trực tiếp, vậy có thể dùng HC người bình thường(có cùng nhóm máu với bệnh nhân đang dc làm xét nghiệm) có được không ạ? và tại sao?


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - tuyenlab - 06-18-2013 11:28 AM

(06-17-2013 10:58 AM)nguyenhang.xn4a Đã viết: Bạn không thể xem link này. Hãy đăng ký thành viên bằng cách bấm vào đây để có thể xem link này.thầy cho e hỏi:trong qui trình làm coombs gián tiếp dùng HCO Rh+ để cho kháng thể thiếu cảm nhiễm nó rồi xác định như coombs trực tiếp, vậy có thể dùng HC người bình thường(có cùng nhóm máu với bệnh nhân đang dc làm xét nghiệm) có được không ạ? và tại sao?

Người ta dùng hồng cầu O để có nhiều vị trí kháng nguyên D cho việc gắn tốt hơn. hồng cầu khác cũng được nhưng không tốt bằng HCO Rh(+)


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - quynhanhvu - 07-09-2013 08:52 PM

Tuyến ơi, cho tớ hỏi phản ứng hòa hợp chỗ cho ht coomb ý có bước nhỏ huyết thanh bệnh nhân và hc người cho, ủ rồi mới ly tâm chứ, ở đây tớ thấy hướng dẫn là cho luôn ht coomb vào với hồng cầu người cho. Ngoài ra nếu có bước rửa sau khi ủ ht bệnh nhân với hồng cầu người cho ko


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - tuyenlab - 07-12-2013 11:00 AM

(07-09-2013 08:52 PM)quynhanhvu Đã viết: Bạn không thể xem link này. Hãy đăng ký thành viên bằng cách bấm vào đây để có thể xem link này.Tuyến ơi, cho tớ hỏi phản ứng hòa hợp chỗ cho ht coomb ý có bước nhỏ huyết thanh bệnh nhân và hc người cho, ủ rồi mới ly tâm chứ, ở đây tớ thấy hướng dẫn là cho luôn ht coomb vào với hồng cầu người cho. Ngoài ra nếu có bước rửa sau khi ủ ht bệnh nhân với hồng cầu người cho ko

Quỳnh Anh xem lại đi, có ủ, có ly tâm và có rửa mà.


RE: Phản ứng hòa hợp đầy đủ - quynhanhvu - 07-14-2013 12:53 AM

tớ hiểu nhầm bước 9, đấy là rửa hc sau khi ủ với hthanh bnhân đúng ko nhỉ